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胡笳桃子

新虫 (小有名气)

[交流] 开环的质粒能用吗?

抽提一个17k大小的重组质粒,抽到的总是开环为多的质粒。
很奇怪。
求问:
1、是不是比较大的质粒很难抽提,容易开环?
2、开环的质粒能用么?
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赠人玫瑰,手有余香。
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圆头

金虫 (小有名气)

对开环的质粒最好在做下步工作前(如转染),应先确认一下,如果没有影响到重组序列,继续做转染是没有问题的.虽然线性化质粒进入细胞效率比环状质粒低些,但进入细胞后重组效率高一些.
13楼2009-04-17 16:39:35
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

是否开环不影响以后的酶切和连接
会当凌绝顶,一览众山小
2楼2009-04-15 00:18:25
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mimisikai

金虫 (小有名气)

较大的质粒在提取过程中很容易断裂开环,其过大,较脆弱。
若是下面进行分子克隆的操作,开环不影响实验;若是用于免疫,则不行。
3楼2009-04-15 08:51:14
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胡笳桃子

新虫 (小有名气)

那么这个是我构建好的重组质粒,是否会影响转化和表达?
赠人玫瑰,手有余香。
4楼2009-04-15 21:15:44
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