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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 开环的质粒能用吗？
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胡笳桃子

新虫 (小有名气)

[交流] 开环的质粒能用吗？

抽提一个17k大小的重组质粒，抽到的总是开环为多的质粒。
很奇怪。
求问：
1、是不是比较大的质粒很难抽提，容易开环？
2、开环的质粒能用么？
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赠人玫瑰，手有余香。
1楼 2009-04-14 21:40:08
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
是否开环不影响以后的酶切和连接
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会当凌绝顶，一览众山小
2楼2009-04-15 00:18:25
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mimisikai

金虫 (小有名气)
较大的质粒在提取过程中很容易断裂开环，其过大，较脆弱。
若是下面进行分子克隆的操作，开环不影响实验；若是用于免疫，则不行。
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3楼2009-04-15 08:51:14
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胡笳桃子

新虫 (小有名气)
那么这个是我构建好的重组质粒，是否会影响转化和表达？
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赠人玫瑰，手有余香。
4楼2009-04-15 21:15:44
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anik

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 胡笳桃子 at 2009-4-15 21:15:
那么这个是我构建好的重组质粒，是否会影响转化和表达？

应该有影响的吧，转化时线性DNA 是不容易进入宿主细胞的。
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5楼2009-04-15 21:30:35
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胡笳桃子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 胡笳桃子 at 2009-4-15 21:15:
那么这个是我构建好的重组质粒，是否会影响转化和表达？

不是线性，是开环。
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赠人玫瑰，手有余香。
6楼2009-04-15 22:23:40
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米见方ggsddu

金虫 (小有名气)

only屋里哇啦
好像转化后细菌能环化开环质粒吧
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低调潜行
7楼2009-04-15 23:00:04
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胡笳桃子

新虫 (小有名气)
啊，真的啊？！
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赠人玫瑰，手有余香。
8楼2009-04-15 23:01:29
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zhaoy02007

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 胡笳桃子 at 2009-4-15 21:15:
那么这个是我构建好的重组质粒，是否会影响转化和表达？

不受影响
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进化中没有失败的物种基因中没有无用的序列生物中没有长久的永恒
9楼2009-04-16 00:25:10
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胡笳桃子

新虫 (小有名气)
好的，太感谢啦
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赠人玫瑰，手有余香。
10楼2009-04-16 23:06:41
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