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Eileen1984金虫 (职业作家)
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[交流]
请教琼脂糖凝胶电泳的问题
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| 最近在做某多糖的琼脂糖凝胶电泳，请有经验者指教上样缓冲液的配置 |
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jiaminl
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2楼2009-04-14 20:47:50
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Eileen1984(金币+1,VIP+0):很详细 4-22 12:27
Eileen1984(金币+1,VIP+0):谢谢 5-4 16:26
Eileen1984(金币+1,VIP+0):很详细 4-22 12:27
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实际工作中常用的缓冲液配制见表  a.TBE浓储存液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温条件下用玻璃瓶保存5X溶液，出现沉淀后则予以废弃。以往都以lX作为使用液(即1：5稀释浓储存液)进行琼脂糖凝胶电泳。但0．5X的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖凝胶电泳都以1：10稀释的储存液作为使用液。进行聚丙烯酰胺凝胶电泳使用的lXTBE，是琼脂糖凝胶电泳时使用液浓度的2倍。聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小，通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1XTBE以提供足够的缓冲容量 b.碱性电泳缓冲液应现用现配 在配制缓冲液时，不论哪一种都需要加适量的EDTA，以除去2价金属离子。另外，硼酸与琼脂糖易形成复合物，使凝胶带负电荷，可能会吸附带正电荷的物质 |
3楼2009-04-17 14:50:40
4楼2009-04-29 22:06:08
5楼2009-05-01 18:06:37