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灭菌
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请问浓度为10g/L的硫酸亚铁溶液可以用高压蒸汽灭菌吗？ 每次往培养基中添加失去的水分，应该先将蒸馏水灭菌吧，灭菌一次可以保存多久？ [ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:17 ] |
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HarveyWang
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请问浓度为10g/L的硫酸亚铁溶液可以用高压蒸汽灭菌吗？ 每次往培养基中添加失去的水分，应该先将蒸馏水灭菌吧，灭菌一次可以保存多久？ （1）10g/L的硫酸亚铁溶液不可以灭菌，要添加的话要过滤除菌。其母液可在酸性条件下（pH1-3）较稳定，建议加点盐酸调pH。建议你配置更高浓度的，例如100g/L，50 mL，这样你加的时候母液体积可减小，可以忽略酸性的硫酸亚铁溶液对培养基pH的影响。 实际上，只要你的母液储存几天以上，这样的高浓度、极低pH硫酸亚铁溶液不会有菌（自动灭了）。我许多时候是灭容器和去离子水，在超净台配置母液。具体操作：用灭过菌的50 mL离心管称出一定量的硫酸亚铁1-4g（加硫酸亚铁之前要称重离心管），称量前后的重量，得出硫酸亚铁的质量，例如是3g，那么就在超净台上加入30 mL灭菌去离子水，盖严并混匀，加盐酸调pH。可以分装1000 uL的EP管（已灭菌）。 这样我可以省略过滤除菌，加的时候在超净台加用枪头加。  （2）如果你是做的细菌培养的话，20-150 mL的培养基灭完菌会损失大约2-10 mL水，补加水太麻烦，况且细菌培养体积不用那么精确（5--8%变动可以的），做培养基装量梯度的实验也不影响效果。要知道，由于液体蒸发，培养时间和温度更是影响培养基体积的因素，你不可能随时添加啊。 （3）灭菌后培养基保存多久，这要看你的灭菌效果如何，容器严密性如何，是培养什么菌的，例如大肠杆菌长得飞快，相对放线菌培养来说更不容易染杂菌。我曾经有放置2个月的摇瓶培养基没有长菌。但建议先灭现用或隔天使用，这才是好习惯。 [ Last edited by HarveyWang on 2009-4-14 at 10:13 ] |
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