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zlnd

银虫 (小有名气)

[交流] 灭菌

请问浓度为10g/L的硫酸亚铁溶液可以用高压蒸汽灭菌吗?
每次往培养基中添加失去的水分,应该先将蒸馏水灭菌吧,灭菌一次可以保存多久?

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:17 ]
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zl382

铁虫 (小有名气)

不能,要过滤除菌,高压灭菌硫酸亚铁会氧化,建议过滤除菌后加几滴盐酸,防止氧化。培养基每次灭菌确实失水,按每100ml多加5ml水就可以了。灭菌的东西尽早用完,尽量别放太久。
后退,绝对是无路可走!
2楼2009-04-14 08:57:00
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

请问浓度为10g/L的硫酸亚铁溶液可以用高压蒸汽灭菌吗?
每次往培养基中添加失去的水分,应该先将蒸馏水灭菌吧,灭菌一次可以保存多久?



(1)10g/L的硫酸亚铁溶液不可以灭菌,要添加的话要过滤除菌。其母液可在酸性条件下(pH1-3)较稳定,建议加点盐酸调pH。建议你配置更高浓度的,例如100g/L,50 mL,这样你加的时候母液体积可减小,可以忽略酸性的硫酸亚铁溶液对培养基pH的影响。

实际上,只要你的母液储存几天以上,这样的高浓度、极低pH硫酸亚铁溶液不会有菌(自动灭了)。我许多时候是灭容器和去离子水,在超净台配置母液。具体操作:用灭过菌的50 mL离心管称出一定量的硫酸亚铁1-4g(加硫酸亚铁之前要称重离心管),称量前后的重量,得出硫酸亚铁的质量,例如是3g,那么就在超净台上加入30 mL灭菌去离子水,盖严并混匀,加盐酸调pH。可以分装1000 uL的EP管(已灭菌)。

这样我可以省略过滤除菌,加的时候在超净台加用枪头加

(2)如果你是做的细菌培养的话,20-150 mL的培养基灭完菌会损失大约2-10 mL水,补加水太麻烦,况且细菌培养体积不用那么精确(5--8%变动可以的),做培养基装量梯度的实验也不影响效果。要知道,由于液体蒸发,培养时间和温度更是影响培养基体积的因素,你不可能随时添加啊。

(3)灭菌后培养基保存多久,这要看你的灭菌效果如何,容器严密性如何,是培养什么菌的,例如大肠杆菌长得飞快,相对放线菌培养来说更不容易染杂菌。我曾经有放置2个月的摇瓶培养基没有长菌。但建议先灭现用或隔天使用,这才是好习惯。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-4-14 at 10:13 ]
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-04-14 10:05:03
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

4楼2009-04-14 10:36:27
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zlnd

银虫 (小有名气)

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那你的硫酸亚铁需要经过什么样的除菌方法呢?
5楼2009-04-14 19:08:13
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dongjiqiao

铁杆木虫 (著名写手)

对啊,你的固体硫酸亚铁保证无菌吗??
long,longlong.
6楼2009-04-19 21:57:03
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