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请大家帮我看看PCR的DNA模板是否不纯,该怎么办?
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各位虫友: 大家好! 在下做PCR上遇到苦难了,希望有高手可以帮我解答一下,下面我就讲一下具体问题: 目前在PCR的反应体系和反应条件完全一致的情况下,一批样品中就只有一个样品不管怎样都p不出来,其余能够成功p出,所以我认为是模板的原因。 DNA模板用0.8%琼脂糖凝胶电泳检验,比较亮,经A260测得浓度为78ug/ml,A260/A280=1.98,A320=0.034(20倍稀释后)。 请问模板有什么问题吗?如果核酸不纯,对PCR影响这么大么?要对模板怎样进一步处理才行? 注:模板添加量为2.5ul(50ul反应体系),是不是太高了? |
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2楼2009-04-14 13:04:08
馨er
木虫 (著名写手)
儿科主任医师
- 应助: 5 (幼儿园)
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- 性别: MM
- 专业: 内分泌系统免疫相关疾病

3楼2009-04-14 15:27:38










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