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[交流]
请大家帮我看看PCR的DNA模板是否不纯，该怎么办？
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各位虫友： 大家好！ 在下做PCR上遇到苦难了，希望有高手可以帮我解答一下，下面我就讲一下具体问题： 目前在PCR的反应体系和反应条件完全一致的情况下，一批样品中就只有一个样品不管怎样都p不出来，其余能够成功p出，所以我认为是模板的原因。 DNA模板用0.8%琼脂糖凝胶电泳检验，比较亮，经A260测得浓度为78ug/ml，A260/A280=1.98，A320=0.034（20倍稀释后）。 请问模板有什么问题吗？如果核酸不纯，对PCR影响这么大么？要对模板怎样进一步处理才行？ 注：模板添加量为2.5ul（50ul反应体系），是不是太高了？ |
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2楼2009-04-14 13:04:08
馨er
木虫 (著名写手)
儿科主任医师
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3楼2009-04-14 15:27:38
