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wanglingyun1981木虫 (小有名气)
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[交流]
胚胎干细胞求助
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求助：关于小鼠胚胎干细胞传代的方法 大虾们，我做小鼠的胚胎干细胞，胚胎接种于饲养层培养4-5d, 待ICM 充分长大, 出现卵圆柱状或岛状形态时, 在体视显微镜下(60×) , 用精细拉制的巴氏管将ICM 从下层的滋胚层细胞切割下来, 转入PBS 液滴中洗涤2 次, 再转入上层覆盖石蜡油的0.25胰酶-EDTA 消化液滴中, 在CO2 培养箱中作用5-8min。用另一支口径小于ICM 细胞团的巴氏管吸入含血清培养液, 因为细胞很小我看不清到底离散成几个细胞了，而且细胞团很难吹打散，将整个液滴都转移到新feeder上，接下来的几天没有看到新的克隆长出。是因为我吹打时太用力损伤了还是什么原因呢？我想知道各位做的时候用的玻璃管拉成什么样子，用的消化酶浓度是多少，具体怎样吹打才行？有照片最好。谢谢各位！！ http://www.stemcell8.cn/viewthre ... dle\" border=\"0\"> |
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wanglingyun1981(金币+1):谢谢参与
wanglingyun1981(金币+1):谢谢参与
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2楼2010-01-27 15:31:26