应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » CRISPR-Cas9中pTargetF-gRNA的构建
81/1返回列表
查看: 3185  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

POCO123

新虫 (初入文坛)

[交流] CRISPR-Cas9中pTargetF-gRNA的构建 已有7人参与

请问哪位大神用pCas,pTargetF做过CRISPR吗？我用一端带有目标序列N20的引物去扩pTargetF,也跑胶验证过了，用DpnI消化PCR产物一小时后，化转到大肠trans5a中让线性的质粒自己连接成环，但是做了好几次板子都不长，是我的做法有什么问题吗？

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-10-31 09:47:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要怎么学习

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by POCO123 at 2018-10-31 09:47:07
请问哪位大神用pCas,pTargetF做过CRISPR吗？我用一端带有目标序列N20的引物去扩pTargetF,也跑胶验证过了，用DpnI消化PCR产物一小时后，化转到大肠trans5a中让线性的质粒自己连接成环，但是做了好几次板子都不长，是 ...

先自连再化转

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
2楼2018-11-08 00:42:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞鸟与冬天

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问楼主你的pCas,pTargetF质粒是买的吗？最近也要做这个，想问一下从哪里买比较快
赞一下 回复此楼
3楼2018-12-25 14:45:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

werq63

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小冀-: 金币-10, 屏蔽内容, 违规存档, 本帖禁止任何形式的广告信息，请注意 2019-03-18 11:09:54
本帖内容被屏蔽
4楼2019-02-02 11:17:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小de小流氓

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
5楼2019-03-17 23:03:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞鸟向前

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 飞鸟与冬天 at 2018-12-25 14:45:52
请问楼主你的pCas,pTargetF质粒是买的吗？最近也要做这个，想问一下从哪里买比较快

你好，请问你拿到质粒了么？我最近也需要~
赞一下 回复此楼
6楼2019-10-31 14:40:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HK驱魔者

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
消化过后片段回收一下
赞一下 回复此楼
7楼2020-10-12 20:07:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

超转运rna

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我要怎么学习 at 2018-11-08 00:42:14
先自连再化转
...

请问怎么自连呀，请教一下，用酶吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2022-09-06 19:51:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 POCO123 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭