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MOFs固定蛋白含量测定问题
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| 我是用沉淀交联法固定蛋白，即10mg uio-66-nh2+700ug/ml的酶 1ml，冰浴搅拌下加饱和硫酸铵将蛋白沉降在材料表面，再加少量戊二醛（终浓度130mm）冰浴2h，交联固定酶，固定完后离心分离，并洗涤材料，每次洗涤材料的上清液拿去测蛋白含量。我做完酶是有活性的，但是每次我反应完溶液整体都是很浓的橙红色，用bradford法测定蛋白含量第一次洗涤液-第二次洗涤液居然是负值，请问大家做酶固定的时候有遇到过这样的问题吗？哪位大神能告诉我下怎么解决啊？我试过透析袋，感觉一点效果都没有 |
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