应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 共转化两个质粒
81/1返回列表
查看: 6084  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] 共转化两个质粒 已有2人参与

各位前辈~~我同时转了一个amp抗性的质粒和一个kan抗性的质粒进DH5α感受态细胞。涂了一个amp的板，一个kan的板，一个amp kan双抗的板。
结果就双抗板没长，其他两个都长了。。。
他们一个是PBR322 ori，一个是ColE1 ori。。。。麻烦大家帮忙分析一下原因~~谢谢！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-10-17 09:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ULYSSEESWB

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小冀-: 金币+5, 正解 2018-10-22 12:43:41
rainontime: 金币+5 2019-03-22 14:19:27
质粒不相容...
pBR322 ori来源于Col E1 ori
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2018-10-18 22:10:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainontime: 金币+5 2019-03-22 14:19:22
可以把质粒抗体装一起试试，单2双1
赞一下 回复此楼
3楼2018-10-19 09:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

成事想心

铁虫 (初入文坛)
楼主您好。我近期也在做将两个质粒同时导入感受态DH5α中。但是在筛选平板上没有长出菌落，不知道您现在做的怎么样了？请问您有什么好的方法吗？期待您的回复。感谢。
赞一下 回复此楼
4楼2019-10-12 21:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
5楼2019-10-13 16:03:43
已阅   申请MicEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

bbrine

新虫 (初入文坛)
我的BL21的菌也是，转两个质粒的菌很难长，我转化了很多次都不行，请问有什么注意事项的吗，比如抗生素浓度是否要比单加抗生素的时候减半
赞一下 回复此楼
6楼2022-02-14 15:16:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学术小辣椒888

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by bbrine at 2022-02-14 15:16:28
我的BL21的菌也是，转两个质粒的菌很难长，我转化了很多次都不行，请问有什么注意事项的吗，比如抗生素浓度是否要比单加抗生素的时候减半

师兄您好，我最近也做了两种不同抗性的质粒同时转染到BL21中，然后涂布到双抗性的板子上面，长了24h没有菌落，师兄最后做出来了嘛

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2024-01-14 19:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

momo莫模

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 学术小辣椒888 at 2024-01-14 19:02:35
师兄您好，我最近也做了两种不同抗性的质粒同时转染到BL21中，然后涂布到双抗性的板子上面，长了24h没有菌落，师兄最后做出来了嘛
...

你可以试试分步转化

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2024-02-29 22:58:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rainontime 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +8 a089 2026-08-07 8/400 2026-08-14 18:46 by beefly
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-14 18:36 by 正能量1斤
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +22 医学老男孩 2026-08-13 48/2400 2026-08-14 18:33 by wuguocheng
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +6 启萌科技 2026-08-12 18/900 2026-08-14 18:18 by xueboshi
[基金申请] 大家玩filecode，现在的申请与受理打不开了 +3 dcqxinyang 2026-08-14 6/300 2026-08-14 18:03 by 690092147
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭