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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 共转化两个质粒
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rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] 共转化两个质粒 已有2人参与

各位前辈~~我同时转了一个amp抗性的质粒和一个kan抗性的质粒进DH5α感受态细胞。涂了一个amp的板，一个kan的板，一个amp kan双抗的板。
结果就双抗板没长，其他两个都长了。。。
他们一个是PBR322 ori，一个是ColE1 ori。。。。麻烦大家帮忙分析一下原因~~谢谢！！！
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1楼 2018-10-17 09:50:48
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ULYSSEESWB

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小冀-: 金币+5, 正解 2018-10-22 12:43:41
rainontime: 金币+5 2019-03-22 14:19:27
质粒不相容...
pBR322 ori来源于Col E1 ori
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2楼2018-10-18 22:10:35
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainontime: 金币+5 2019-03-22 14:19:22
可以把质粒抗体装一起试试，单2双1
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3楼2018-10-19 09:22:03
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成事想心

铁虫 (初入文坛)
楼主您好。我近期也在做将两个质粒同时导入感受态DH5α中。但是在筛选平板上没有长出菌落，不知道您现在做的怎么样了？请问您有什么好的方法吗？期待您的回复。感谢。
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4楼2019-10-12 21:52:47
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匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
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5楼2019-10-13 16:03:43
已阅   申请MicEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

bbrine

新虫 (初入文坛)
我的BL21的菌也是，转两个质粒的菌很难长，我转化了很多次都不行，请问有什么注意事项的吗，比如抗生素浓度是否要比单加抗生素的时候减半
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6楼2022-02-14 15:16:28
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学术小辣椒888

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by bbrine at 2022-02-14 15:16:28
我的BL21的菌也是，转两个质粒的菌很难长，我转化了很多次都不行，请问有什么注意事项的吗，比如抗生素浓度是否要比单加抗生素的时候减半

师兄您好，我最近也做了两种不同抗性的质粒同时转染到BL21中，然后涂布到双抗性的板子上面，长了24h没有菌落，师兄最后做出来了嘛

发自小木虫IOS客户端
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7楼2024-01-14 19:02:35
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momo莫模

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 学术小辣椒888 at 2024-01-14 19:02:35
师兄您好，我最近也做了两种不同抗性的质粒同时转染到BL21中，然后涂布到双抗性的板子上面，长了24h没有菌落，师兄最后做出来了嘛
...

你可以试试分步转化

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8楼2024-02-29 22:58:15
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