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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 内科 » 悬浮细胞感染怎么做
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Wendy啦啦

新虫 (初入文坛)

[求助] 悬浮细胞感染怎么做 已有1人参与

有没有哪位童鞋做过悬浮细胞感染啊，之前加完病毒液离心一小时，常温，转染效率非常低，昨天有老师建议离心2小时，但要保持37度，离心机很难做到啊，求问各位大神有悬浮细胞转染成功的吗？怎么做的？重谢！

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1楼 2018-10-09 10:35:50
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问是转siRNA还是DNA?悬浮细胞比普通的贴壁细胞要难转,所以细胞的状态在转染实验的重要性就更为重要了，转染的条件需要优化是一方面，另一些方面细胞状态必须要好。我们实验室刚开始做HL60细胞转染的时候用Lipo发现细胞毒性有点大，听了其他实验室同学的介绍换了RFect，用下来飘起来的细胞不多，整个转染实验过程没有换液
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5楼2019-05-16 08:51:01
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云上风清

新虫 (初入文坛)
收集病毒液，然后过滤，1：1加入培基细胞混合液和病毒液，感染48小时 再筛选
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做该做的事，才叫成长。。。
2楼2018-10-11 09:33:46
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Wendy啦啦

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 云上风清 at 2018-10-11 09:33:46
收集病毒液，然后过滤，1：1加入培基细胞混合液和病毒液，感染48小时 再筛选

悬浮细胞这么感染过，没有成功

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3楼2018-10-13 19:36:45
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)
悬浮细胞，有转染过293F，使用的是RFectSP sRNA Transfection Reagent ，转染的效果还是可以的，细胞转染阳性率都在75%以上，注意的是转染过程不可添加抗生素，否则会导致细胞死亡。
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4楼2019-03-06 10:45:45
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