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Wendy啦啦

新虫 (初入文坛)

[求助] 悬浮细胞感染怎么做 已有1人参与

有没有哪位童鞋做过悬浮细胞感染啊,之前加完病毒液离心一小时,常温,转染效率非常低,昨天有老师建议离心2小时,但要保持37度,离心机很难做到啊,求问各位大神有悬浮细胞转染成功的吗?怎么做的?重谢!

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云上风清

新虫 (初入文坛)

收集病毒液,然后过滤,1:1加入培基细胞混合液和病毒液,感染48小时 再筛选
做该做的事,才叫成长。。。
2楼2018-10-11 09:33:46
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Wendy啦啦

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 云上风清 at 2018-10-11 09:33:46
收集病毒液,然后过滤,1:1加入培基细胞混合液和病毒液,感染48小时 再筛选

悬浮细胞这么感染过,没有成功

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3楼2018-10-13 19:36:45
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

悬浮细胞,有转染过293F,使用的是RFectSP sRNA Transfection Reagent ,转染的效果还是可以的,细胞转染阳性率都在75%以上,注意的是转染过程不可添加抗生素,否则会导致细胞死亡。
4楼2019-03-06 10:45:45
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问是转siRNA还是DNA?悬浮细胞比普通的贴壁细胞要难转,所以细胞的状态在转染实验的重要性就更为重要了,转染的条件需要优化是一方面,另一些方面细胞状态必须要好。我们实验室刚开始做HL60细胞转染的时候用Lipo发现细胞毒性有点大,听了其他实验室同学的介绍换了RFect,用下来飘起来的细胞不多,整个转染实验过程没有换液
5楼2019-05-16 08:51:01
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