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关于多底物酶促反应，底物浓度的确定。
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有问题请教大神们，最近在做多底物酶促反应的酶活测定，具体反应方程是这样的：ATP + L-Citrulline + L-Aspartate <=> AMP + Diphosphate + N-(L-Arginino)succinate 。在这种情况下，怎么选择各个底物的最适浓度以确定酶活呢？主要是不知道怎么下手，是不是先查阅文献，看文献里各个底物的Km值，在进行测定呢。比如，先让ATP 、 L-Citrulline底物浓度过量，然后改变 L-Aspartate 浓度，根据曲线获得其Km值。随后使 L-Aspartate、ATP 浓度过量，测定 底物L-Citrulline Km值。 |
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