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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » HET-1a转染求助
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gwen6356

铁虫 (小有名气)

[交流] HET-1a转染求助

请问有没有人做HET-1A细胞转染实验的？
我的转染用Inventrogen 公司试剂，脂质体加6ul，但转染后细胞时好时坏，变成梭型，加抗生素筛选后，细胞死亡很多！我该怎么办？
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1楼 2009-04-09 12:48:25
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lovewisdom

铜虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢，欢迎常来生物版~ 4-9 14:19
我们都没有按照PROTOCOL上lipfectamine的量来加，一般都减半，不然毒性太大
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2楼2009-04-09 13:09:43
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gwen6356

铁虫 (小有名气)
谢谢，那细胞出现梭形变化（本来铺的很开），怎么办呢？我测PH在7.2
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3楼2009-04-09 14:43:34
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)
有些细胞转染质粒后，表达构建蛋白对细胞本身的生存有影响，有时会改变细胞形态，你要从你的实验去分析，抗生素筛选后，细胞死亡很多，你应该做对比，来了解你的转染效率，如果不是很高的话，细胞死亡是正常的。
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4楼2009-04-09 16:21:37
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gwen6356

铁虫 (小有名气)
可是细胞筛选头两天都挺好的，而且我转染入的基因应该会提高其生存效率，至少不会因为这个杀死细胞。你们有做过这种细胞的转染么，我觉得转染后一段时间内，这种细胞都很脆弱
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5楼2009-04-09 16:50:38
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