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gwen6356

铁虫 (小有名气)

[交流] HET-1a转染求助

请问有没有人做HET-1A细胞转染实验的?
我的转染用Inventrogen 公司试剂,脂质体加6ul,但转染后细胞时好时坏,变成梭型,加抗生素筛选后,细胞死亡很多!我该怎么办?
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lovewisdom

铜虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢,欢迎常来生物版~ 4-9 14:19
我们都没有按照PROTOCOL上lipfectamine的量来加,一般都减半,不然毒性太大
2楼2009-04-09 13:09:43
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gwen6356

铁虫 (小有名气)

谢谢,那细胞出现梭形变化(本来铺的很开),怎么办呢?我测PH在7.2
3楼2009-04-09 14:43:34
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

有些细胞转染质粒后,表达构建蛋白对细胞本身的生存有影响,有时会改变细胞形态,你要从你的实验去分析,抗生素筛选后,细胞死亡很多,你应该做对比,来了解你的转染效率,如果不是很高的话,细胞死亡是正常的。
4楼2009-04-09 16:21:37
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gwen6356

铁虫 (小有名气)

可是细胞筛选头两天都挺好的,而且我转染入的基因应该会提高其生存效率,至少不会因为这个杀死细胞。你们有做过这种细胞的转染么,我觉得转染后一段时间内,这种细胞都很脆弱
5楼2009-04-09 16:50:38
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