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cyh2010

铁虫 (正式写手)

[交流] [求助] 请教酶用量的表示方法和酶活力的问题.

请问酶活1000U/mg, 如果将1mg酶 溶解在10mL水中,是不是酶活的表示为100U/mL了,一般用于酶降解测试的酶用量应该是多少比较合适?
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cyh2010

铁虫 (正式写手)

2楼2009-04-09 11:16:43
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j2

木虫 (正式写手)

U是酶活性单位的嘛,不好一概而论
修炼ing,当虫仙……
3楼2009-04-09 12:30:52
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cyh2010

铁虫 (正式写手)

做酶解实验的时候,是将酶溶解在一定体积的缓冲液中的,因此要涉及到体积了,不知道这种表示方法是否合理,还有更好的表示方法吗
4楼2009-04-09 12:52:39
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cyh2010

铁虫 (正式写手)

发金币了
5楼2009-04-09 14:48:24
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cyh2010

铁虫 (正式写手)

还有没有人知道啊
6楼2009-04-09 20:14:26
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cyh2010

铁虫 (正式写手)

有人回个笑脸就给金币
7楼2009-04-10 12:18:13
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HarveyWang

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酶活计算

★ ★
cyh2010(金币+2,VIP+0):谢谢你的回复 4-10 14:20
1000U/mg E       100U/mg E
-----------------   = -------------------- .
10 mL                     1 mL


酶比活的计算公式:

我用1000 uL反应体积测定酶活,
用到的酶比活的计算公式见附图。

其单位为μmol/(mg Protein·min)。

其中,
ΔA为在测定时间Δt(min)内反应系统在测定波长的吸光值的变化;
VE 为测定的酶液加入的体积 (μL);
ε(μM) 为所用的底物的微摩尔消光系数,可由底物的标准曲线求出。例如NADPH或NADH在340 nm的毫摩尔消光系数为6.22 mM-1·cm-1,其微摩尔消光系数即0.00622 μM-1· m-1,其意义即在1 cm的光路中1.0 μmol/L 浓度的NADPH或NADH其在340 nm的吸光值为0.00622。
CPr为酶液的蛋白浓度(g/L或μg/mL)。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2009-04-10 12:29:11
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HarveyWang

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海外行者


cyh2010(金币+1,VIP+0):谢谢你的笑脸支持,呵呵 4-10 14:20
引用回帖:
Originally posted by cyh2010 at 2009-4-10 12:18:
有人回个笑脸就给金币



LZ不要吝啬啊,我给你12个笑脸啊
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
9楼2009-04-10 12:30:26
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★
cyh2010(金币+2,VIP+0):谢谢你的回复 4-10 14:20
请问酶活1000U/mg, 如果将1mg酶 溶解在10mL水中,是不是酶活的表示为100U/mL了,一般用于酶降解测试的酶用量应该是多少比较合适?


酶用量要自己摸索的。这跟你的反应条件有关,例如你用反应体系的pH、温反应时间等。

你用什么酶,就去查查那个酶的常用的条件是什么,酶活大约的范围,然后优化反应体系的pH、温反应时间等。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
10楼2009-04-10 12:35:40
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