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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » [求助] 请教酶用量的表示方法和酶活力的问题.
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cyh2010

铁虫 (正式写手)

[交流] [求助] 请教酶用量的表示方法和酶活力的问题.

请问酶活1000U/mg, 如果将1mg酶 溶解在10mL水中，是不是酶活的表示为100U/mL了,一般用于酶降解测试的酶用量应该是多少比较合适？
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1楼 2009-04-09 10:16:36
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cyh2010

铁虫 (正式写手)
2楼2009-04-09 11:16:43
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j2

木虫 (正式写手)
U是酶活性单位的嘛，不好一概而论
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
3楼2009-04-09 12:30:52
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cyh2010

铁虫 (正式写手)
做酶解实验的时候，是将酶溶解在一定体积的缓冲液中的，因此要涉及到体积了，不知道这种表示方法是否合理，还有更好的表示方法吗
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4楼2009-04-09 12:52:39
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cyh2010

铁虫 (正式写手)
发金币了
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5楼2009-04-09 14:48:24
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cyh2010

铁虫 (正式写手)
还有没有人知道啊
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6楼2009-04-09 20:14:26
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cyh2010

铁虫 (正式写手)
有人回个笑脸就给金币
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7楼2009-04-10 12:18:13
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HarveyWang

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海外行者

酶活计算

★ ★
cyh2010(金币+2,VIP+0):谢谢你的回复 4-10 14:20
1000U/mg E       100U/mg E
-----------------   = -------------------- .
10 mL                     1 mL


酶比活的计算公式：

我用1000 uL反应体积测定酶活，
用到的酶比活的计算公式见附图。

其单位为μmol/(mg Protein·min)。

其中，
ΔA为在测定时间Δt（min）内反应系统在测定波长的吸光值的变化；
VE 为测定的酶液加入的体积 （μL）；
ε（μM） 为所用的底物的微摩尔消光系数，可由底物的标准曲线求出。例如NADPH或NADH在340 nm的毫摩尔消光系数为6.22 mM-1·cm-1，其微摩尔消光系数即0.00622 μM-1· m-1，其意义即在1 cm的光路中1.0 μmol/L 浓度的NADPH或NADH其在340 nm的吸光值为0.00622。
CPr为酶液的蛋白浓度（g/L或μg/mL）。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2009-04-10 12:29:11
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HarveyWang

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海外行者
★
cyh2010(金币+1,VIP+0):谢谢你的笑脸支持，呵呵 4-10 14:20
引用回帖:
Originally posted by cyh2010 at 2009-4-10 12:18:
有人回个笑脸就给金币



LZ不要吝啬啊，我给你12个笑脸啊
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
9楼2009-04-10 12:30:26
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★ ★
cyh2010(金币+2,VIP+0):谢谢你的回复 4-10 14:20
请问酶活1000U/mg, 如果将1mg酶 溶解在10mL水中，是不是酶活的表示为100U/mL了,一般用于酶降解测试的酶用量应该是多少比较合适？


酶用量要自己摸索的。这跟你的反应条件有关，例如你用反应体系的pH、温反应时间等。

你用什么酶，就去查查那个酶的常用的条件是什么，酶活大约的范围，然后优化反应体系的pH、温反应时间等。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
10楼2009-04-10 12:35:40
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