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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于DH5a转化中遇到的问题,谢谢!!!

昨天用一个卡那霉素抗性的载体转化DH5a,约16h观察转化平板,发现长出来的转化子很小很少。
关键是转化子那么小,都不知道是不是。
是不是应该再多培养一会?卡那霉素大约多久会失效?

ps 我用的卡那抗性是50ug/ml
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

DH5a长的慢,16小时本身就长不了很大
For my life!
2楼2009-04-09 09:01:57
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

那是不是卡那抗性加多了?我看到有个帖子在讨论转化的时候卡那只需加30ug/ml,是这样吗?

还是只要平板长久一些就可以?

[ Last edited by melodyxin on 2009-4-9 at 09:10 ]
3楼2009-04-09 09:07:37
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

影响不大
For my life!
4楼2009-04-09 09:10:42
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

哦,那我把平板在37度放久些再看看,谢谢了。
5楼2009-04-09 09:11:45
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

用不着,能挑就好了
For my life!
6楼2009-04-09 09:12:38
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

另外我想问问,用Amp平板得到的转化子很多,但用卡那却那么少。
是我的操作问题,还是抗生素不同造成?
7楼2009-04-09 09:12:53
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by winter_gates at 2009-4-9 09:12:
用不着,能挑就好了

哦……可是真的很小耶。
感觉很难挑的样子。。。。
8楼2009-04-09 09:14:11
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

不一定,跟你转化的链接产物有关系,多少与抗性没有很直接的线性关系。
For my life!
9楼2009-04-09 09:14:37
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

引用回帖:
Originally posted by melodyxin at 2009-4-9 09:14:


哦……可是真的很小耶。
感觉很难挑的样子。。。。

那就等一等,但是长的时间越久,就需要你多挑几个来鉴定。
For my life!
10楼2009-04-09 09:15:15
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