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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于DH5a转化中遇到的问题，谢谢！！！
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于DH5a转化中遇到的问题，谢谢！！！

昨天用一个卡那霉素抗性的载体转化DH5a，约16h观察转化平板，发现长出来的转化子很小很少。
关键是转化子那么小，都不知道是不是。
是不是应该再多培养一会？卡那霉素大约多久会失效？

ps 我用的卡那抗性是50ug/ml
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1楼 2009-04-09 08:43:14
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
DH5a长的慢，16小时本身就长不了很大
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2楼2009-04-09 09:01:57
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
那是不是卡那抗性加多了？我看到有个帖子在讨论转化的时候卡那只需加30ug/ml，是这样吗？

还是只要平板长久一些就可以？

[ Last edited by melodyxin on 2009-4-9 at 09:10 ]
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3楼2009-04-09 09:07:37
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
影响不大
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4楼2009-04-09 09:10:42
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
哦，那我把平板在37度放久些再看看，谢谢了。
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5楼2009-04-09 09:11:45
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
用不着，能挑就好了
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6楼2009-04-09 09:12:38
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
另外我想问问，用Amp平板得到的转化子很多，但用卡那却那么少。
是我的操作问题，还是抗生素不同造成？
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7楼2009-04-09 09:12:53
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by winter_gates at 2009-4-9 09:12:
用不着，能挑就好了

哦……可是真的很小耶。
感觉很难挑的样子。。。。
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8楼2009-04-09 09:14:11
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
不一定，跟你转化的链接产物有关系，多少与抗性没有很直接的线性关系。
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9楼2009-04-09 09:14:37
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
引用回帖:
Originally posted by melodyxin at 2009-4-9 09:14:


哦……可是真的很小耶。
感觉很难挑的样子。。。。

那就等一等，但是长的时间越久，就需要你多挑几个来鉴定。
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For my life！
10楼2009-04-09 09:15:15
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