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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 咨询NGS建库相关实验原理
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实验室小白鼠

铜虫 (初入文坛)

[求助] 咨询NGS建库相关实验原理 已有2人参与

我看有些文献上有说一步法建库和两步法建库，我想咨询下各位请问下这两个的区别？

我自己看文献的理解是：一步法是拿到基因组，超声打断后直接加A加接头，之后进行PCR完成文库构建；两步法我不太了解，好像是先基因组打断，然后再连接再打断到200bp?相当于两次打断，我没有找到更多的资料，希望各位了解的给我一点资源，让我多了解一下这个，谢谢！
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LifeIsStruggle.
1楼 2018-09-26 14:44:36
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前尘一笑

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-09-26 18:49:27
可以去illumina官网 找不同的建库方法   nextra XT 可能就是两步法
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2楼2018-09-26 16:58:57
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602059625

金虫 (知名作家)
不要看中文文献
不管什么法，就是为了在两端加上一段已知序列

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
3楼2018-09-26 22:53:52
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老liao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

现在测序公司建库用得最多的就是你提到的一步法，多数商品化试剂盒也是这个流程，比如 Illumina、NEB、诺维赞、诺禾致源等相关建库试剂，你自己去下载试剂盒说明书，里面有完整的protocol。WGS基本都是这样建的。
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4楼2018-11-07 18:09:21
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