24小时热门版块排行榜    

查看: 369  |  回复: 4
当前主题已经存档。

守口如瓶1

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【已解决】做RACE的同胞看过来~~~~~~~~~

使用smart试剂盒做5'RACE,合成第一链cDNA的过程中是否一定要过柱纯化呢?

    我看到的说明书上是过柱纯化后利用末端转移酶活性继续合成第一链cDNA,使之含有5'接头引物序列,但有人说不用过柱,因此感到一些疑惑。

   望做RACE的同胞能够多多指教。

[ Last edited by 守口如瓶1 on 2009-4-11 at 21:40 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

守口如瓶1

铁虫 (初入文坛)

急求解答
2楼2009-04-09 11:33:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hugang2004_2000

木虫 (正式写手)

smart合成的是杂交链,在合成第一链的之前就已经加了接头的啊。怎么我用的试剂盒(cat. no. 634914)里面没有过柱子的步骤?过柱子,好像是cDNA文库的时候才用到的吧?
3楼2009-04-11 10:39:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenmene

金虫 (正式写手)

贴心小棉袄

不用过的啊
小溪边的戏水,稻田里的长长黄黄的谷穗,池塘里的小泥鳅,夏夜里的萤火虫...谁为我摘下幽兰天空的那弯月...
4楼2009-04-11 11:46:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

守口如瓶1

铁虫 (初入文坛)

谢谢哈,我已经找到答案了,说是用smart试剂盒很贵,那个RT酶除了有反转录酶的活性还有末端转移酶活性自动加CCC(咋就这专一捏),不用另外的末端转移酶,过柱的那种是另外一种试剂盒。

我就纳闷,我找的说明书是咱一回事?

还是谢谢各位了
5楼2009-04-11 21:38:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 守口如瓶1 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +46 医学老男孩 2026-08-13 103/5150 2026-08-18 15:33 by dcqxinyang
[基金申请] 明天放榜? +3 Shxjjxjkx 2026-08-18 3/150 2026-08-18 15:32 by a441914426
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +6 yuleib84 2026-08-18 7/350 2026-08-18 15:02 by sytp
[教师之家] 两姐妹,一个辛辛苦苦30岁工作当大学教师,另一个23岁就工作当开车教练 +3 瞬息宇宙 2026-08-11 5/250 2026-08-18 14:55 by LNP@mRNA
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 8/400 2026-08-18 11:47 by gltch
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +5 基诺咪客 2026-08-17 6/300 2026-08-18 11:06 by hunter无悔
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
信息提示
请填处理意见