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dsl7564335

新虫 (初入文坛)

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[求助] HPLC操作已有2人参与

洗柱子用的等度洗脱，分析用的二元梯度洗脱。那我洗完柱子后，进样的时候应该怎么平衡柱子啊？第一次用液相，请各位大神赐教。

@学术巨星 @学术巨星 @wyy080214 @wyy080214 @superyeast @klicking @鸭绿江畔发自小木虫Android客户端

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1楼 2018-09-25 11:29:38

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

jianxiao88

木虫 (正式写手)

应助: 25 (小学生)
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性别: GG
专业: 色谱分析

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

方法1、梯度洗脱需要用到A、B两路，因此在平衡时，可设置A：B=50：50平衡一段时间（5-10min左右即可），之后再将比例调整为梯度程序的初始比例平衡一段时间，待基线稳定后即可进样；
方法2、可以先直接运行一次梯度程序，之后再进样。一般情况下，运行完一次程序，系统即可平衡好。
利弊分析：前者费人工省时间，后者省人工费时间，可根据实际情况自行选择（个人感觉后者效果要优于前者）。

若该方法运行时间过长，后者特别耽误时间，也可自己新建梯度方法，专用于平衡系统。
1、初始比例和结束比例最好与原方法保持一致；
2、通过缩短梯度变化的时间来达到节省时间的目的。