应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于蛋白引物PCR问题
91/1返回列表
查看: 262  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

蓝色基因

金虫 (正式写手)

[交流] 关于蛋白引物PCR问题

一些相关文献中，蛋白引物PCR时退火温度不但不遵守Tm减去5的一般引物设计规律，有的甚至比引物Tm值还高上5度，请问一下这个有什么影响么？还是都是通过温度梯度摸索出来的呢？

设计了一对蛋白引物，Tm值为72.82，这个Tm值目前为止见过最高的一个。GC含量为52.17%

[ Last edited by 蓝色基因 on 2009-4-7 at 18:15 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-04-07 17:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
350784478(金币+1):谢谢
各个软件Tm的计算方法并不一样
我倒是建议更具引物合成单上写的50mM Na+强度下的Tm值加3~5度作为退火温度，每次我都能做出来
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-04-07 17:08:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
=v=另外，没有所谓的“蛋白质”引物……非常不专业的说法……
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-07 17:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝色基因

金虫 (正式写手)
非常不好意思！已经改为蛋白引物。

我用的是生工合成的引物，引物说明书上提供的是 1 M Na+的Tm值，为88.22，请问
该怎么换算成你说的50 mM再加上3-5度呢。

再次感谢。
赞一下 回复此楼
4楼2009-04-07 18:18:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝色基因

金虫 (正式写手)
没有其他做蛋白的兄弟们，大家顶一下。
赞一下 回复此楼
5楼2009-04-08 13:26:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allen8368

木虫 (正式写手)
蛋白引物是什么东东？
赞一下 回复此楼
慢慢的认识你，再慢慢的忘记你...........
6楼2009-04-08 15:55:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
呃……居然只有1M Na+的数据，那太诡异了……
只好根据primer 5当初设计出来的减3~5度的经验了
或者输入到oligo analyzer去分析，google一下
赞一下 回复此楼
7楼2009-04-08 16:10:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
我也有点懵了，从来没听说过蛋白引物，你是pcr吗？pcr蛋白？应该是编码蛋白基因序列的引物吧
赞一下 回复此楼
会当凌绝顶，一览众山小
8楼2009-04-08 16:33:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝色基因

金虫 (正式写手)
唉，又被看出来了。

半路出家做蛋白看来真的很难啊。

“编码蛋白基因序列的引物”！
赞一下 回复此楼
9楼2009-04-08 21:54:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蓝色基因 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 11/550 2026-03-01 19:47 by 无懈可击111
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭