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x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] RNA提取 已有4人参与

我用trizol试剂提取植物中的总RNA,异丙醇沉淀的时候看到明显的沉淀,类似白色,跑电泳的时候除了28s 18s两条带外,还有其他的条带,不是荧光色的(我用的goldview染色,RNA条带是绿色荧光,另外在18s后面有黄色的模糊的条带),是不是我提的RNA纯度不够(可是我测了吸光值,挺合适的)?另外,我问老师,他说RNA沉淀应该很难看到,是胶状的……各位做过RNA提取的虫友帮帮忙,给点建议,谢谢

[ Last edited by amisking on 2009-7-1 at 21:57 ]
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kangkang997

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
RNA浓度高时沉淀是看得到得,不过有时沉淀吹得快干时又差不多透明了,如果你的图片看上去好像有拖尾现象说明RNA降解了,如果你是说它的条带数目的话我想说的是不同生物它所含的条带数可能是不同的,我见过这样的文献,有些植物的RNA有5条带,至于28S的亮度和宽度是18S的2倍也不是一定的,跑RNA电泳关键是看RNA的完整性,如果没有拖尾现象应该就没什么问题
27楼2009-07-01 19:43:09
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):欢迎常来! 4-8 09:02
黄色条带?
可能污染了少量的DNA
测OD无法区分DNA和RNA的
2楼2009-04-07 17:07:06
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-4-7 17:07:
黄色条带?
可能污染了少量的DNA
测OD无法区分DNA和RNA的

谢谢。那怎么尽量除掉DNA呢?我接下来要做反转录,有DNA污染的话是不是不可以呢?
3楼2009-04-07 20:52:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

提取的时候不要吸到trizol层就可以了,宁可损失一点也不要吸到下界面的东西
4楼2009-04-07 23:41:39
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