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simonsong3新虫 (小有名气)
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[求助]
细胞提取蛋白简易方法
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今天从隔壁实验室听到他们从细胞中提取蛋白的方法很简单，直接将培养皿中培养基吸掉，pbs洗一遍，直接往皿中滴加适量1xSDS loading，收到EP管里100℃煮20min即可点样跑胶。他们做的western质量还不错，但是由于没尝试过，加上也没见过这种protocol，所以不敢轻易尝试，不知道有没有大神了解这种方法，和传统lysis buffer裂解收蛋白的优劣对比如何。 发自小木虫Android客户端 |
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我们实验室一般也是这样做。比如6孔板，每个孔加300μ升 loading，100度裂解10分钟。在最开始铺细胞的时候一般大家都是要求每孔相同细胞数，一般细胞生长速度彼此间差异不是非常明显的前提下，最后收的蛋白跑WB都比较齐，当然，跑一次看看，要是不齐就重新调整跑一次。也可以先粗略定个量再跑 发自小木虫Android客户端 |
9楼2018-09-07 08:53:19
choujiaoqi
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3楼2018-09-05 21:34:12
simonsong3
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4楼2018-09-05 23:15:53
