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一直找不到亚克隆 已有4人参与
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本人从今年三月开始就一直在做亚克隆的实验，但是一直没有找到。阳性克隆部分酶切切取2-4k片段和制备好的载体用T4DNA连接酶连接，然后电转，转化后涂板子。培养基里加有抗生素，照理说长不出几个克隆，可是每次涂完板子就有100-200个单菌落，从中任意挑取几个单菌落摇菌，出现过以下几种情况：1.摇不浓 2.摇的浓提质粒跑胶检测，发现一管质粒都提不出来 3.摇的浓提质粒跑胶检测，15管里提出1管，做双酶切验证发现不是我要的亚克隆。 重复了好多好多次，不知道是哪一步出了问题，请高手指点一下，不胜感激！ 发自小木虫IOS客户端 |
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