24小时热门版块排行榜    

查看: 3581  |  回复: 8

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 如何验证一个蛋白对另一个蛋白有抑制或者激活作用 已有2人参与

各位大神:我现在发现一个SUMO E3连接酶和一个转录因子有互作,但我想知道这种互作到底是增强了他的转录活性还是抑制还是没有明显作用,要通过什么实验来做?是不是那种需要报告基因的实验?求解答。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-08-28 08:10:51
lwk5716: 金币+1 2018-08-28 12:29:43
对,reporter assay是研究转录活性的黄金标准
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2018-08-27 18:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

报告基因是不是一般一个蛋白,另外一个是启动子,那两个蛋白,再加一个启动子,三个可以吗?

发自小木虫Android客户端
3楼2018-08-28 12:29:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lwk5716: 金币+1 2018-08-30 12:13:57
lwk5716: 金币+5 2018-08-30 12:14:29
引用回帖:
3楼: Originally posted by lwk5716 at 2018-08-28 06:29:30
报告基因是不是一般一个蛋白,另外一个是启动子,那两个蛋白,再加一个启动子,三个可以吗?

没问题。
比如你的问题,假设报告基因是GFP,也可以是luciferase,Neo,反正不重要。重要的是promoter,那才是和转录因子(TF)互作的。你想知道SUMO E3是加强了还是减弱了TF的功能,看GFP变强或减弱了就好。
总结就是,对照设计好就没有问题。
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2018-08-28 21:50:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1937mcq

金虫 (初入文坛)

努力后生

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lwk5716: 金币+1 2018-08-30 12:14:08
lwk5716: 金币+2 2018-08-30 12:14:20
转录因子对蛋白的作用,那应该是作用于启动子,抑制或者促进启动子的活性,我们实验室是用含有GUS和LUC报告基因的载体,采用基因枪轰击或者原生质体转化的实验来进行的,然后测LUC报告基因的活性。当然含有其他报告基因的载体一样可以,只要能把这种互作的结果变成可以检测的数据就都可以。
心若向阳,无谓悲伤!
5楼2018-08-29 16:04:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 1937mcq at 2018-08-29 16:04:06
转录因子对蛋白的作用,那应该是作用于启动子,抑制或者促进启动子的活性,我们实验室是用含有GUS和LUC报告基因的载体,采用基因枪轰击或者原生质体转化的实验来进行的,然后测LUC报告基因的活性。当然含有其他报告 ...

谢谢您

发自小木虫Android客户端
6楼2018-08-30 12:15:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by drwhoknowss at 2018-08-28 21:50:46
没问题。
比如你的问题,假设报告基因是GFP,也可以是luciferase,Neo,反正不重要。重要的是promoter,那才是和转录因子(TF)互作的。你想知道SUMO E3是加强了还是减弱了TF的功能,看GFP变强或减弱了就好。
总 ...

好,感谢。

发自小木虫Android客户端
7楼2018-08-30 12:15:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

皮皮虾子

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
哈哈哈 我也做SUMO 化
哥,就是我
8楼2019-09-19 15:32:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小乌贼

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
体外无细胞讲解实验

发自小木虫Android客户端
9楼2020-03-17 06:33:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lwk5716 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 3/150 2026-08-23 16:30 by lXgU0RvNTDC9
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 15:18 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
信息提示
请填处理意见