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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC保留时间前移的相关问题
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织田信宗

金虫 (初入文坛)

[求助] HPLC保留时间前移的相关问题 已有2人参与

本人新手，第一次使用庚烷磺酸钠作为HPLC的流动相跑图，之前询问过一些大佬说是使用离子对试剂要多平衡一段时间，因此跑图前平衡了24小时，但是平衡后我的标准品保留时间不断前移，24小时基本上会前移1分钟，换了流动相（配制方法完全一致）、色谱柱（用了三种色谱柱）、仪器（两台）、考察了温度、流动相的混合方式都没有解决这个问题，有大佬能够帮忙分析一下么，感谢各位大佬
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1楼 2018-08-24 15:10:02
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王其超

新虫 (小有名气)
你要知道平衡有前平衡和后平衡啊，哪有走样之前平衡24小时的啊

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2楼2018-08-24 22:55:52
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nnnnnnnnnn

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王其超 at 2018-08-24 22:55:52
你要知道平衡有前平衡和后平衡啊，哪有走样之前平衡24小时的啊

什么叫前平衡和后平衡啊，有什么不一样吗，请大神解惑
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3楼2018-08-25 11:42:39
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太阳张

新虫 (小有名气)
平衡24小时是谁教你的？

发自小木虫IOS客户端
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4楼2018-08-25 21:03:36
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木木lee

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、流动相配制均匀且保持室温；
2、控制房间温湿度；
3、进样前多进几针空白；
4、注意样品的PH
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5楼2018-08-26 11:19:46
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zx_nick

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
织田信宗: 金币+10, ★★★很有帮助 2018-08-27 13:44:33
1、管路是否有气泡，流动相ph值 、脱气等

2、用庚烷磺酸钠的话，以我的经验，初始比例2个小时足矣

3、如果是等度，那么肯定是1的问题

4、如果是梯度，那么就是出完目标峰后，升到高有机相重新一段时间，回到初始后再比例运行3-5分钟即可。

5、如果还漂的话，请列出化合物名称，及你的仪器条件。。
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6楼2018-08-26 23:09:43
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织田信宗

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 太阳张 at 2018-08-25 21:03:36
平衡24小时是谁教你的？

加了一个液相群，群里有个大佬之前做过一个样品就是平衡24h再进样
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7楼2018-08-27 13:39:51
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织田信宗

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王其超 at 2018-08-24 22:55:52
你要知道平衡有前平衡和后平衡啊，哪有走样之前平衡24小时的啊

平衡的前平衡和后平衡有什么区别么
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8楼2018-08-27 13:40:31
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织田信宗

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 木木lee at 2018-08-26 11:19:46
1、流动相配制均匀且保持室温；
2、控制房间温湿度；
3、进样前多进几针空白；
4、注意样品的PH

谢谢，都试过了，保留时间还是不断前移
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9楼2018-08-27 13:42:44
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织田信宗

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zx_nick at 2018-08-26 23:09:43
1、管路是否有气泡，流动相ph值 、脱气等

2、用庚烷磺酸钠的话，以我的经验，初始比例2个小时足矣

3、如果是等度，那么肯定是1的问题

4、如果是梯度，那么就是出完目标峰后，升到高有机相重新一段时间，回 ...

确实是使用等度分析样品，分析对象是L-半胱氨酸，分析条件为Waters e2695高效液相色谱仪，色谱柱为Welch Xtimate C18,4.6X250mm，5μm，流动相为甲醇：水（磷酸二氢钠、庚烷磺酸钠、磷酸），管路流动相检查过气泡没有问题，而且随着平衡的时间增长，保留时间的前移越来越慢，但是还是在前移
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10楼2018-08-27 13:54:14
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