应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 重组蛋白纯化问题
71/1返回列表
查看: 611  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手

[交流] 重组蛋白纯化问题

请教各位虫友个问题：
采用HIS-TAG标签纯化重组蛋白，缓冲溶液中的咪唑一定要用脱盐柱洗脱吗？
也就是是不是一定要经过脱盐的步骤？不脱盐的话对酶的纯度有影响（就是电泳图上是否有杂带？）还是对酶的活力有影响？
谢谢各位的指教
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-04-03 09:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
不一定啊，看你下一步实验有没有要求你脱咪唑了。而且脱盐不一定就是把盐全部脱了，没有盐，蛋白不好溶解的。再者，脱咪唑方法很多，不见的就是脱盐（其实脱盐麻烦），透析、超滤都是很好用的方法。咪唑对酶的影响因酶而异。有的升高，有的降低，有的不变，甚至还有一些导致沉淀或者增容。咪唑是小分子，不可能影响酶的纯度，不然的话怎么可能脱盐去除？
做实验之前，好好看下原理在这样就不会糊涂，会更了解你的实验，也就能够分析出来错误或者正确的原因。
赞一下 回复此楼
For my life！
2楼2009-04-03 11:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手
引用回帖:
Originally posted by winter_gates at 2009-4-3 11:18:
不一定啊，看你下一步实验有没有要求你脱咪唑了。而且脱盐不一定就是把盐全部脱了，没有盐，蛋白不好溶解的。再者，脱咪唑方法很多，不见的就是脱盐（其实脱盐麻烦），透析、超滤都是很好用的方法。咪唑对酶的影响 ...

呵呵，谢谢啊，因为我们不是专门做生物的，而是做环境的，那么酶纯化这块懂得就不是特别多了，非常感谢
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-03 14:17:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
透析就好了
回复此楼
4楼2009-04-03 16:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
按照Ni柱的实验说明来做就可以了，讲的很详细的。
赞一下 回复此楼
5楼2009-04-03 16:50:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2009-4-3 16:40:
透析就好了

呵呵，非常感谢，就是怕透析会把辅基和酶分离，从而使酶失去活性，不知道存不存在这种可能？
赞一下 回复此楼
6楼2009-04-03 19:26:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手
引用回帖:
Originally posted by anik at 2009-4-3 16:50:
按照Ni柱的实验说明来做就可以了，讲的很详细的。

哈哈，谢谢指教，就是因为脱盐柱坏了又不想耽误实验所以想问问
赞一下 回复此楼
7楼2009-04-03 19:27:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zh1987hs 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +46 医学老男孩 2026-08-13 102/5100 2026-08-18 14:41 by qinwangshen
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +5 yuleib84 2026-08-18 6/300 2026-08-18 14:34 by 阿荣喝酒
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KZyU1THERRVo 2026-08-18 4/200 2026-08-18 13:28 by vHWVV9D5Deb5
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 8/400 2026-08-18 11:47 by gltch
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 5/250 2026-08-18 11:25 by 無關想念
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭