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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术讨论 » 很急，请各位帮忙解答一下EDC/NHS活化羧基的问题，拜谢。
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fiy22

新虫 (小有名气)

[求助] 很急，请各位帮忙解答一下EDC/NHS活化羧基的问题，拜谢。已有2人参与

向含羧基的硫化硐纳米粒子溶液中加入EDC/NHS，反应10分钟后，就总会发生聚集情况，反应介质在PBS(pH 7.4)或MES(pH 6)都试过了，一样会出现聚集。这是怎么回事啊？请各位大神帮忙解答一下，不胜感激！@dut_ameng
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1楼2018-08-17 19:57:13
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fiy22

新虫 (小有名气)
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2楼2018-08-18 20:37:23
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jodan1000

至尊木虫 (著名写手)
活化后粒子的负电被中和，缺少负电的粒子少了基于静电斥力，所以团聚但是不影响交联，假如需要偶联的蛋白一样可以达到很好的效果

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3楼2018-08-19 14:57:48
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fiy22

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jodan1000 at 2018-08-19 14:57:48
活化后粒子的负电被中和，缺少负电的粒子少了基于静电斥力，所以团聚但是不影响交联，假如需要偶联的蛋白一样可以达到很好的效果

我的就是偶联蛋白，但我想问的是偶联蛋白时都团聚析出来了，这就不能做接下来的实验了啊，怎么达到一样的效果呢？您做过这个嘛，能详细解答一下吗？非常感谢您

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4楼2018-08-19 15:35:00
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jodan1000

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
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4楼: Originally posted by fiy22 at 2018-08-19 15:35:00
我的就是偶联蛋白，但我想问的是偶联蛋白时都团聚析出来了，这就不能做接下来的实验了啊，怎么达到一样的效果呢？您做过这个嘛，能详细解答一下吗？非常感谢您
...

其实粒子团聚并不影响蛋白的包被的，一样保证包被均一，蛋白以抗体为例其大小远不是这个肉眼的团聚就能影响渗透到颗粒表面。这个团聚一般是松散的可逆的，所以直接加抗体就行

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5楼2018-08-19 19:42:26
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jodan1000

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fiy22 at 2018-08-19 15:35:00
我的就是偶联蛋白，但我想问的是偶联蛋白时都团聚析出来了，这就不能做接下来的实验了啊，怎么达到一样的效果呢？您做过这个嘛，能详细解答一下吗？非常感谢您
...

这种表面不带电的情况下对物理吸附是有利的，抗体先物理吸附到颗粒表面才能实现化学偶联。而且加入抗体以后，这种团聚现象一般也会改善一些，相当于加了抗体以后胶体分散性得到了改善

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6楼2018-08-19 19:45:01
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fiy22

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jodan1000 at 2018-08-19 19:45:01
这种表面不带电的情况下对物理吸附是有利的，抗体先物理吸附到颗粒表面才能实现化学偶联。而且加入抗体以后，这种团聚现象一般也会改善一些，相当于加了抗体以后胶体分散性得到了改善
...

嗯非常感谢您的解答。但我直接加入蛋白后，还是有沉淀析出，没有因为加入蛋白而变好。请问您有什么好的建议吗？谢谢

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7楼2018-08-20 13:10:13
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genhunter

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以试下更亲水的Sulfo-NHS
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离成功还差一点
8楼2018-08-20 13:13:25
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fiy22

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by genhunter at 2018-08-20 13:13:25
可以试下更亲水的Sulfo-NHS

试过了不行，而且只加EDC不加NHS也会出现团聚。您有什么建议吗？谢谢

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9楼2018-08-20 14:15:19
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genhunter

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

建议在有机相活化，然后加入到含有表活的蛋白隅联体系
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离成功还差一点
10楼2018-08-20 14:52:46
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