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robot551

金虫 (正式写手)

[交流] 求救:新配的考马斯亮蓝溶液咋呈深蓝色?

用考马斯亮蓝G-250法测蛋白质浓度,正常的考马斯亮蓝溶液是棕褐色,与蛋白质作用后显蓝色,但我配出来的考马斯亮蓝溶液却是蓝色的,根本不能用。
我把容量器和试剂瓶等重新洗了一遍,再配制仍然如此。我的配方及配制方法都是正确的。考马斯亮蓝G-250 100mg先溶于50mL95%乙醇中,加100毫升85%磷酸,去离子水稀释到1升
在百度和google里查了下,有的说可能的原因是器皿被蛋白质污染了,但我觉得这种可能性不大。
不知何故,实验因此而停下来了。求救于各位虫子帮忙分析分析,有没有遇到过同样的问题,是什么原因导致的,怎么解决这个问题??
谢谢了,急啊!!

[ Last edited by robot551 on 2009-4-4 at 08:46 ]
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我是我2082

木虫 (职业作家)


robot551(金币+1,VIP+0):我已经百度和GOOGLE了,这个我看到过。不是问题所在,谢谢关注 4-2 21:14
我在Google上找到的,你可以照下面的试试下,看还有没有你所描述的情况

染色液配制: 1 mol/ L 盐酸溶液(A) ,1 g/ L CBB G250 溶液(B) ; 应用时用1 ml A 液和15 ml B 液混合加水至1 L , 搅拌混匀。

注意,关键所在是应用的时候再混合,不要配好等着染色。
2楼2009-04-02 20:47:50
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

是不是说Bradford方法?一般这个溶液都是买现成的,然后稀释
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-04-02 21:18:19
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robot551

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2009-4-2 21:18:
是不是说Bradford方法?一般这个溶液都是买现成的,然后稀释

就是Bradford法,能买现成当然最好了,只是现在要自己配制。
以前经常用这种方法,只是这次出问题了。
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4楼2009-04-02 21:28:37
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yumo

新虫 (小有名气)

★ ★
350784478(金币+1):谢谢提供
robot551(金币+1,VIP+0):我的步骤跟你的一样,应该没有问题,你配出来的是红色的么?我的是深蓝色~ 4-3 08:46
前几天刚配了这东西。步骤是这样的,考马斯亮蓝G-250 100mg溶于50mL95%乙醇中,加入100毫升85%磷酸,用双蒸水稀释到1000毫升,滤纸过滤。没出现什么异常情况。是用的这个吗?若没,试试。
5楼2009-04-02 22:22:58
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mofatuzi

新虫 (小有名气)


350784478(金币+1):谢谢提供
你们的配方为何和我们实验室的差这么多?楼主试试我的配方,配成后是深蓝色接近黑色。全新燃料染色只要10分钟。

R250考马斯亮蓝0.5g
甲醇450ml
冰醋酸100ml
用水定容到1L
6楼2009-04-02 22:45:12
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yidiankucao

铁虫 (初入文坛)

我的配方也是
R250考马斯亮蓝0.5g
甲醇450ml
冰醋酸100ml
用水定容到1L
然后用滤纸过滤一下就好。呈特别黑蓝色。而且很多时候我都反复用,都没有问题的。
楼主加油,试试,肯定行。
7楼2009-04-03 01:09:21
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robot551

金虫 (正式写手)

6楼和7楼两位用的是考马斯亮蓝R-250,我用的是考马斯亮蓝G-250
方法不一样,配方当然不同了
谢谢关注!
我们微笑,想念,咫尺天涯……
8楼2009-04-03 08:48:40
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112976553

金虫 (小有名气)

配个靠马死亮蓝还有这么多区别,以前还真不知道。学习!
9楼2009-04-03 09:32:09
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yumo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by robot551 at 2009-4-2 21:28:

就是Bradford法,能买现成当然最好了,只是现在要自己配制。
以前经常用这种方法,只是这次出问题了。

不是红色啊,是不是你的试剂出问题了,换个新的试试。
10楼2009-04-03 12:04:14
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