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两板定量结果不一致该怎么办 已有1人参与
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各位道友，最近我在做一个基因是否在一种植物里面有表达，根据NCBI上面的序列设计了定量引物，做了一板定量，结果很乱，但是刚好在我预测有表达的那个器官处有表达，鉴于结果不好，可信度不是很高，我又重做了一板，结果是几乎所有的器官都没有表达，上一板有表达的那个器官只起了一点峰，其他的都没起峰，大家有类似的情况吗，我这个结果是不是需要跑第三次，但我想了解下出现这种情况的原因。望各位一起修仙的道友，帮我解答下疑惑 @biostar2009 发自小木虫IOS客户端 |
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【答案】应助回帖
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建议先考虑下引物的问题，定量引物设计好（最好设计两对，相互比较趋势）先用确定表达的样品试一试引物，用半定量rt-pcr，跑胶看下条带大小是否正确、有没有非特异扩增。这两板定量产物还在也可以跑胶看看大小是否正确。 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2018-08-15 18:50:52