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杨繁花

新虫 (初入文坛)

[求助] 两板定量结果不一致该怎么办 已有1人参与

各位道友,最近我在做一个基因是否在一种植物里面有表达,根据NCBI上面的序列设计了定量引物,做了一板定量,结果很乱,但是刚好在我预测有表达的那个器官处有表达,鉴于结果不好,可信度不是很高,我又重做了一板,结果是几乎所有的器官都没有表达,上一板有表达的那个器官只起了一点峰,其他的都没起峰,大家有类似的情况吗,我这个结果是不是需要跑第三次,但我想了解下出现这种情况的原因。望各位一起修仙的道友,帮我解答下疑惑

@biostar2009 发自小木虫IOS客户端
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议先考虑下引物的问题,定量引物设计好(最好设计两对,相互比较趋势)先用确定表达的样品试一试引物,用半定量rt-pcr,跑胶看下条带大小是否正确、有没有非特异扩增。这两板定量产物还在也可以跑胶看看大小是否正确。

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2019更好更棒!
2楼2018-08-15 18:50:52
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