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Agonilb

新虫 (小有名气)

[求助] 启动子 已有2人参与

各位大神,有关于启动子克隆的问题,还请各位指点指点,
已经克隆出基因全长2937bp,测序正确,现在要做该基因的启动子,6月2号提取了植物基因组DNA,现在用takara公司的步移盒子做启动子,扩到第三次巢式的时候没有条带了,第二次的条带是800左右,做的好几次,一直是800左右,测序过一次,不合适。不知道是哪里出问题了,之前做的时候有条带,测序之后不合适,就换引物了。
谢谢大家@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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Agonilb

新虫 (小有名气)

换引物之后,第三次巢式就没有结果了
2楼2018-07-28 09:55:09
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elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
takara公司的步移盒子做启动子也是基于TAIL-PCR技术原理的吧?
如果没有目的条带只能说明引物不合适了,3轮pcr下来,片段应该会越来越短才对,特异性越来越高
3楼2018-07-30 13:10:51
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Agonilb

新虫 (小有名气)

就是前两次有,但第三次就没了

发自小木虫Android客户端
4楼2018-07-30 13:20:12
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Agonilb

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by elmanbio at 2018-07-30 13:10:51
takara公司的步移盒子做启动子也是基于TAIL-PCR技术原理的吧?
如果没有目的条带只能说明引物不合适了,3轮pcr下来,片段应该会越来越短才对,特异性越来越高

谢谢你
就是前两次有,但第三次就没了

发自小木虫Android客户端
5楼2018-07-30 13:21:25
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张帆FAN

新虫 (初入文坛)

你好 我想问下 怎么克隆基因全场

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6楼2018-11-05 11:57:36
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匿名

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本帖仅楼主可见
7楼2018-11-05 20:52:52
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