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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 启动子
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Agonilb

新虫 (小有名气)

[求助] 启动子 已有2人参与

各位大神，有关于启动子克隆的问题，还请各位指点指点，
已经克隆出基因全长2937bp，测序正确，现在要做该基因的启动子，6月2号提取了植物基因组DNA，现在用takara公司的步移盒子做启动子，扩到第三次巢式的时候没有条带了，第二次的条带是800左右，做的好几次，一直是800左右，测序过一次，不合适。不知道是哪里出问题了，之前做的时候有条带，测序之后不合适，就换引物了。
谢谢大家@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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1楼 2018-07-28 09:52:00
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Agonilb

新虫 (小有名气)
换引物之后，第三次巢式就没有结果了
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2楼2018-07-28 09:55:09
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elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
takara公司的步移盒子做启动子也是基于TAIL-PCR技术原理的吧？
如果没有目的条带只能说明引物不合适了，3轮pcr下来，片段应该会越来越短才对，特异性越来越高
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3楼2018-07-30 13:10:51
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Agonilb

新虫 (小有名气)
就是前两次有，但第三次就没了

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4楼2018-07-30 13:20:12
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Agonilb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by elmanbio at 2018-07-30 13:10:51
takara公司的步移盒子做启动子也是基于TAIL-PCR技术原理的吧？
如果没有目的条带只能说明引物不合适了，3轮pcr下来，片段应该会越来越短才对，特异性越来越高

谢谢你
就是前两次有，但第三次就没了

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5楼2018-07-30 13:21:25
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张帆FAN

新虫 (初入文坛)
你好 我想问下 怎么克隆基因全场

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6楼2018-11-05 11:57:36
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匿名

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7楼2018-11-05 20:52:52
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