24小时热门版块排行榜    

查看: 991  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Agonilb

新虫 (小有名气)

[求助] 启动子 已有2人参与

各位大神,有关于启动子克隆的问题,还请各位指点指点,
已经克隆出基因全长2937bp,测序正确,现在要做该基因的启动子,6月2号提取了植物基因组DNA,现在用takara公司的步移盒子做启动子,扩到第三次巢式的时候没有条带了,第二次的条带是800左右,做的好几次,一直是800左右,测序过一次,不合适。不知道是哪里出问题了,之前做的时候有条带,测序之后不合适,就换引物了。
谢谢大家@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
takara公司的步移盒子做启动子也是基于TAIL-PCR技术原理的吧?
如果没有目的条带只能说明引物不合适了,3轮pcr下来,片段应该会越来越短才对,特异性越来越高
3楼2018-07-30 13:10:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

Agonilb

新虫 (小有名气)

换引物之后,第三次巢式就没有结果了
2楼2018-07-28 09:55:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Agonilb

新虫 (小有名气)

就是前两次有,但第三次就没了

发自小木虫Android客户端
4楼2018-07-30 13:20:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Agonilb

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by elmanbio at 2018-07-30 13:10:51
takara公司的步移盒子做启动子也是基于TAIL-PCR技术原理的吧?
如果没有目的条带只能说明引物不合适了,3轮pcr下来,片段应该会越来越短才对,特异性越来越高

谢谢你
就是前两次有,但第三次就没了

发自小木虫Android客户端
5楼2018-07-30 13:21:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见