24小时热门版块排行榜    

查看: 446  |  回复: 5
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

61930979

金虫 (小有名气)

[交流] 关于融合蛋白的酶切问题

本人现在得到了纯化的蛋白,想要做复性,准备使用复性试剂盒,但之前要先进行酶切,融合蛋白上携带的是凝血酶切割位点,因为对酶切的具体操作不太懂,特想求助一下,怎样确定酶切的条件(凝血酶切割的条件),有人说要摸索不同的条件,即温度、时间、酶浓度,是不是这样呢??麻烦高手给具体指点一下,不胜感激!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)

★ ★
61930979(金币+2,VIP+0):ok 4-1 17:08
变性条件下的变性剂会极大抑制酶活性,复性后再摸索酶切条件吧,对于不同的融和蛋白,酶切效果差别很大,多摸索一下温度和时间条件才
4楼2009-04-01 14:52:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

alexlv

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
61930979(金币+3,VIP+0): 谢 4-1 17:07
变性条件下没法酶切,因为变性缓冲液条件不适合酶切,复性后,再酶切比较好,酶切条件按照说明书就可以了。
2楼2009-04-01 09:19:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

61930979

金虫 (小有名气)

谢谢 提醒
我打算买复性试剂盒的,技术支持说最好是酶切后再复性。
你说的也对 酶切是要求在ph8.0下进行的,而我的纯化产物pH为4.5,确实不适合酶切
那就是要先按复性试剂盒说明书先复性看看效果,效果不行再酶切吗??
3楼2009-04-01 14:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

61930979

金虫 (小有名气)

谢谢
希望有人能提供相关方面(先复性后酶切)的论文以供参考
5楼2009-04-01 17:10:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +14 tcxiaoxx 2026-03-20 16/800 2026-03-25 23:14 by peike
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 289求调剂 +9 怀瑾握瑜l 2026-03-20 9/450 2026-03-25 11:02 by userper
[考研] 286求调剂 +11 Faune 2026-03-21 11/550 2026-03-25 10:11 by 雾散后相遇lc
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 321求调剂 +4 Ymlll 2026-03-24 4/200 2026-03-24 14:44 by sprinining
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
信息提示
请填处理意见