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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 请问关于载体pCAMBIA1301?

该载体是植物表达载体,一般通过农杆菌介导将它转化到宿主中。

现在的问题是:我的基因序列上的酶切位点是XhoI和XbaI,但是载体的该两个切点之间有一个CAMV35S promoter,可以删除吗?这个是什么东西呢?

附载体图:

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melodyxin

铜虫 (小有名气)

另外,报告基因GUS是不是可以删去?具体如何删?
3楼2009-04-01 00:08:30
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

这是一个双元载体,35s启动子一个是启动kana抗性基因的,一个是gus报告基因的,切掉之后检测就比较困难了,所以建议你还是换一个酶切位点Hindiii和BamHI,而且酶切位点最合适的地方就是多克隆位点,如图就是为了让你的目的基因插入的地方

[ Last edited by sutao1979 on 2009-3-31 at 22:20 ]
会当凌绝顶,一览众山小
2楼2009-03-31 22:17:16
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2009-3-31 22:17:
这是一个双元载体,35s启动子一个是启动kana抗性基因的,一个是gus报告基因的,切掉之后检测就比较困难了,所以建议你还是换一个酶切位点Hindiii和BamHI,而且酶切位点最合适的地方就是多克隆位点,如图就是为了让 ...

哦谢谢,可是我不需要报告基因表达,想把它删掉。不知道怎么删。
4楼2009-04-01 00:13:13
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

那就对这个载体重新改造了,还是双酶切,再连接,或者酶切之后进行片段分离,然后再连接,剩下的就是检测了,pcr或者菌落筛选......
会当凌绝顶,一览众山小
5楼2009-04-01 00:49:32
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