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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问关于载体pCAMBIA1301？
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 请问关于载体pCAMBIA1301？

该载体是植物表达载体，一般通过农杆菌介导将它转化到宿主中。

现在的问题是：我的基因序列上的酶切位点是XhoI和XbaI，但是载体的该两个切点之间有一个CAMV35S promoter，可以删除吗？这个是什么东西呢？

附载体图：
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1楼 2009-03-31 21:58:35
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
这是一个双元载体，35s启动子一个是启动kana抗性基因的，一个是gus报告基因的，切掉之后检测就比较困难了，所以建议你还是换一个酶切位点Hindiii和BamHI，而且酶切位点最合适的地方就是多克隆位点，如图就是为了让你的目的基因插入的地方

[ Last edited by sutao1979 on 2009-3-31 at 22:20 ]
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会当凌绝顶，一览众山小
2楼2009-03-31 22:17:16
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
另外，报告基因GUS是不是可以删去？具体如何删？
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3楼2009-04-01 00:08:30
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2009-3-31 22:17:
这是一个双元载体，35s启动子一个是启动kana抗性基因的，一个是gus报告基因的，切掉之后检测就比较困难了，所以建议你还是换一个酶切位点Hindiii和BamHI，而且酶切位点最合适的地方就是多克隆位点，如图就是为了让 ...

哦谢谢，可是我不需要报告基因表达，想把它删掉。不知道怎么删。
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4楼2009-04-01 00:13:13
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
那就对这个载体重新改造了，还是双酶切，再连接，或者酶切之后进行片段分离，然后再连接，剩下的就是检测了，pcr或者菌落筛选......
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会当凌绝顶，一览众山小
5楼2009-04-01 00:49:32
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