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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于纳米氧化铁的细胞毒性试验
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XY星雨XY

银虫 (小有名气)

[求助] 关于纳米氧化铁的细胞毒性试验 已有2人参与

细胞毒性试验，我们实验室常用的就是CCK，但是我的材料纳米四氧化三铁有较深的颜色，吸光度测得的结果比对照组要高，应该不是增值引起的吧？不知道怎么排除这种干扰，或者有其他替代试验吗？有朋友做过该材料的这种试验吗
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1楼 2018-07-24 21:31:09
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

simple__plan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把溶液吸出来测吸光度。或者细胞染色，数数。
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4楼2018-07-25 14:08:18
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simple__plan

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by XY星雨XY at 2018-07-25 15:17:32
当时是加两倍量的CCK溶液，测的时候吸出来一半测的，结果还是偏高。您说的细胞染色，数数，具体该怎么操作呢...

cck8不用加倍啊，它有线性范围，超过1.几就没有差别了。既然材料吸附在细胞上，就不会分散到溶液里，用上层溶液测OD应该是可行的（还有材料不和cck8反应）。染色计数，就是用染料染细胞核，然后在荧光显微镜下计视野内的细胞数，但是和视野选取有关，也有误差。先做几遍cck8的实验吧，氧化铁那么重，肯定会沉降，不会影响吸光度的。现把cck8的量恢复正常值吧。
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6楼2018-07-25 15:31:47
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蟲暖花开

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得此时的背景值应该是纳米粒子+细胞没有加MTT.而空白组是细胞+MTT.  活率也就是  （实验组-背景）/（对照-空白）
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松柏之志，经霜丰茂
7楼2018-09-25 14:58:10
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普通回帖

morningbear

至尊木虫 (著名写手)
设置空白孔，不加细胞，加相同浓度的氧化铁。每个水平都设置空白，就可以扣除了。

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2楼2018-07-25 12:19:59
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XY星雨XY

银虫 (小有名气)
我在想可以直接这样扣吗？因为之前也大概看过，就是说没有细胞的时候，PBS洗过以后挺干净的，但是有细胞组就不一样了，材料会粘在细胞上，洗过后还是有一定颜色，所以估计效果不会太好

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3楼2018-07-25 12:29:31
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XY星雨XY

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by simple__plan at 2018-07-25 14:08:18
把溶液吸出来测吸光度。或者细胞染色，数数。

当时是加两倍量的CCK溶液，测的时候吸出来一半测的，结果还是偏高。您说的细胞染色，数数，具体该怎么操作呢
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5楼2018-07-25 15:17:32
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蟲暖花开

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

cck-8也同样可以这么做，这样的话就排除细胞吸收的纳米粒子自身的吸光度，前提是保证你的纳米粒子没有染菌
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松柏之志，经霜丰茂
8楼2018-09-25 15:01:39
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XY星雨XY

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 蟲暖花开 at 2018-09-25 15:01:39
cck-8也同样可以这么做，这样的话就排除细胞吸收的纳米粒子自身的吸光度，前提是保证你的纳米粒子没有染菌

我试一下吧，谢谢您
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9楼2018-10-10 14:45:46
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大一环境啊哈

新虫 (小有名气)
离心測上清

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10楼2020-06-20 20:28:59
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