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XY星雨XY

银虫 (小有名气)

[求助] 关于纳米氧化铁的细胞毒性试验 已有2人参与

细胞毒性试验,我们实验室常用的就是CCK,但是我的材料纳米四氧化三铁有较深的颜色,吸光度测得的结果比对照组要高,应该不是增值引起的吧?不知道怎么排除这种干扰,或者有其他替代试验吗?有朋友做过该材料的这种试验吗
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simple__plan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把溶液吸出来测吸光度。或者细胞染色,数数。
4楼2018-07-25 14:08:18
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simple__plan

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by XY星雨XY at 2018-07-25 15:17:32
当时是加两倍量的CCK溶液,测的时候吸出来一半测的,结果还是偏高。您说的细胞染色,数数,具体该怎么操作呢...

cck8不用加倍啊,它有线性范围,超过1.几就没有差别了。既然材料吸附在细胞上,就不会分散到溶液里,用上层溶液测OD应该是可行的(还有材料不和cck8反应)。染色计数,就是用染料染细胞核,然后在荧光显微镜下计视野内的细胞数,但是和视野选取有关,也有误差。先做几遍cck8的实验吧,氧化铁那么重,肯定会沉降,不会影响吸光度的。现把cck8的量恢复正常值吧。
6楼2018-07-25 15:31:47
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蟲暖花开

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得此时的背景值应该是纳米粒子+细胞没有加MTT.而空白组是细胞+MTT.  活率也就是  (实验组-背景)/(对照-空白)
松柏之志,经霜丰茂
7楼2018-09-25 14:58:10
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普通回帖

morningbear

至尊木虫 (著名写手)

设置空白孔,不加细胞,加相同浓度的氧化铁。每个水平都设置空白,就可以扣除了。

发自小木虫IOS客户端
2楼2018-07-25 12:19:59
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XY星雨XY

银虫 (小有名气)

我在想可以直接这样扣吗?因为之前也大概看过,就是说没有细胞的时候,PBS洗过以后挺干净的,但是有细胞组就不一样了,材料会粘在细胞上,洗过后还是有一定颜色,所以估计效果不会太好

发自小木虫Android客户端
3楼2018-07-25 12:29:31
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XY星雨XY

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by simple__plan at 2018-07-25 14:08:18
把溶液吸出来测吸光度。或者细胞染色,数数。

当时是加两倍量的CCK溶液,测的时候吸出来一半测的,结果还是偏高。您说的细胞染色,数数,具体该怎么操作呢
5楼2018-07-25 15:17:32
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蟲暖花开

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

cck-8也同样可以这么做,这样的话就排除细胞吸收的纳米粒子自身的吸光度,前提是保证你的纳米粒子没有染菌
松柏之志,经霜丰茂
8楼2018-09-25 15:01:39
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XY星雨XY

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 蟲暖花开 at 2018-09-25 15:01:39
cck-8也同样可以这么做,这样的话就排除细胞吸收的纳米粒子自身的吸光度,前提是保证你的纳米粒子没有染菌

我试一下吧,谢谢您
9楼2018-10-10 14:45:46
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大一环境啊哈

新虫 (小有名气)

10楼2020-06-20 20:28:59
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