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BamH1和MluI双酶切 已有2人参与
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求助!本人纯分子克隆的小白,但是不好意思所有的问题都问师兄师姐,还望各种虫友相助! 最近用BamH1和MluI双酶切,都是NEB的HF省时酶,cusmart缓冲液,公司说明书上说这两种酶在cusmart中效率为100%,但是我现在的载体根本切不开,我在网上查的MluI这个酶效率比较低,不加保护碱基时效率为0,有保护碱基50.我的insert加了保护碱基,可是载体是公司买的没有保护碱基,分别试了双酶切2小时和7小时,但是最后的没有阳性克隆,各位大神帮忙分析一下是怎么回事呀! 发自小木虫Android客户端 |
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莫落
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