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茹茹茹小刺

新虫 (小有名气)

[求助] 酵母双杂-酵母转入质粒后在一缺液体培养基上不长?

向大神求助:将我的质粒用醋酸锂的方法转入到酵母YY187中,在sd-trp缺陷型平板上三天能长出白斑,比Y187菌株要小很多;接种到sd-trp液体培养基中,菌长到OD600=0.12左右的时候就不再生长,长四五天液体培养基依然澄清。而且菌接种到YPDA液体培养基中菌可以很快生长起来。
质粒应该是转到了酵母中,取酵母单克隆提质粒PCR是有目的条带的。
因为后续实验中,还需要再转质粒进缺陷酵母,所以不敢直接用YPDA液体培养基。
请问有遇到这种情况的吗?为什么菌在SD-Trp液体培养基中长不大呢(大概要求OD600到0.5就可以)?求问解决办法…
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铁虫 (初入文坛)

很可能你的蛋白对酵母有毒性,建议加入空载体做个对照看看。

发自小木虫IOS客户端
2楼2018-07-30 22:35:22
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