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策马入林

新虫 (小有名气)

[交流] 酵母双杂交筛库测序都是polyT

使用clotech的gold Y2H系统进行酵母双杂交筛库,通过二缺和四缺含x-gal的板子筛选出蓝斑后,进行菌液PCR,引物为AD载体上的引物序列,PCR产物送测序,结果前面46bp为载体序列,后面出现polyT,测了十几个都是如此,不知道哪位大神可以帮忙分析下是怎么回事
谢谢
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小城旧时光。

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
3楼: Originally posted by Lxl9527 at 2018-08-09 22:33:37
请问四缺含x-gal的板子怎么铺啊,求指教

四缺培养基灭菌完降温到五六十度的时候加X-α-Gal。我是这样弄的

发自小木虫Android客户端
4楼2018-08-15 22:45:15
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Lxl9527

木虫 (小有名气)

15578299798


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问四缺含x-gal的板子怎么铺啊,求指教
可乐丽Type系列硬碳、TZ系列硬碳、活性炭YP50F、YP80
3楼2018-08-09 22:33:37
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Lxl9527

木虫 (小有名气)

15578299798


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问可以加你微信吗?酵母双杂交问题talk
可乐丽Type系列硬碳、TZ系列硬碳、活性炭YP50F、YP80
5楼2018-08-18 15:26:35
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长村老宅

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你测序不应该先分离质粒吗,把BD的筛掉只留下AD的再用引物测序...
6楼2018-09-25 16:25:06
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