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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酵母双杂交筛库测序都是polyT
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策马入林

新虫 (小有名气)

[交流] 酵母双杂交筛库测序都是polyT

使用clotech的gold Y2H系统进行酵母双杂交筛库，通过二缺和四缺含x-gal的板子筛选出蓝斑后，进行菌液PCR，引物为AD载体上的引物序列，PCR产物送测序，结果前面46bp为载体序列，后面出现polyT，测了十几个都是如此，不知道哪位大神可以帮忙分析下是怎么回事
谢谢
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1楼 2018-07-13 21:13:52
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策马入林

新虫 (小有名气)
求大神回复
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2楼2018-07-15 10:12:38
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Lxl9527

木虫 (小有名气)

15578299798
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问四缺含x-gal的板子怎么铺啊，求指教
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可乐丽Type系列硬碳、TZ系列硬碳、活性炭YP50F、YP80
3楼2018-08-09 22:33:37
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小城旧时光。

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by Lxl9527 at 2018-08-09 22:33:37
请问四缺含x-gal的板子怎么铺啊，求指教

四缺培养基灭菌完降温到五六十度的时候加X-α-Gal。我是这样弄的

发自小木虫Android客户端
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4楼2018-08-15 22:45:15
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Lxl9527

木虫 (小有名气)

15578299798
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问可以加你微信吗？酵母双杂交问题talk
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可乐丽Type系列硬碳、TZ系列硬碳、活性炭YP50F、YP80
5楼2018-08-18 15:26:35
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长村老宅

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你测序不应该先分离质粒吗，把BD的筛掉只留下AD的再用引物测序...
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6楼2018-09-25 16:25:06
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巫可

铁虫 (初入文坛)
同样的问题
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7楼2018-10-12 17:15:30
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巫可

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问现在找到原因和解决方法了么？
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8楼2018-10-12 17:34:02
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