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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教GST pull-down assay和免疫共沉淀的区别？
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liang918

金虫 (小有名气)

[交流] 请教GST pull-down assay和免疫共沉淀的区别？

在别处看了别人的帖子，但还是有些迷糊，希望有人指导。
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爱老婆，爱工作
1楼 2009-03-29 21:48:40
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everbeen

木虫 (小有名气)
GST pull-down一般指用一个带GST tag的重组蛋白，与目的蛋白进行孵育，最后用结合GST的Beads拉下相互作用复合物。
co-IP一般是用某一蛋白的抗体，在细胞裂解液中与相应的蛋白结果，用Protein A/G将抗原抗体复合物拉下，最后在拉下的复合物中检测目的蛋白的实验。

二者都是用于检测蛋白相互作用的实验。区别是pull-down一般是验证in vitro相互作用；co-IP一般用于检测细胞水平的in vivo相互作用。

特殊的，也有人在重组蛋白水平，利用抗原抗体的反应，来进行pull-down实验。但这种方法文献里用得很少，而且，该属于pull-down还是co-IP，本人没看到明确定义。
个人认为应该属于pull-down。
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2楼2009-03-30 18:19:09
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liang918

金虫 (小有名气)
非常感谢能够作答，不过我怎么感觉都是在体外水平检测蛋白相互作用，因为都是通过细胞裂解获得的蛋白，我对两者的区别还是不太明白，能不能重点讲下他们的区别。
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爱老婆，爱工作
3楼2009-04-01 16:52:55
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宁静3293

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
co-IP虽然也是在细胞裂解得到蛋白，但这时候复合体已经形成了。也就是说蛋白复合体在体内形成。
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4楼2009-12-23 16:46:01
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liudaihualyh

金虫 (小有名气)
免疫共沉淀是用抗原抗体原理，而GST pull-down也可形象的叫基因垂钓
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5楼2009-12-25 23:17:06
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thinka

铜虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
pull-down:就是两个人放到一个孤岛上,不管是什么性别,该发生的都会发生的
Co-IP:把一群人放到一个荒岛上,能不能发生故事就看你了
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6楼2009-12-26 01:24:13
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qdwmq

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by thinka at 2009-12-26 01:24:
pull-down:就是两个人放到一个孤岛上,不管是什么性别,该发生的都会发生的
Co-IP:把一群人放到一个荒岛上,能不能发生故事就看你了

很形象！
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7楼2010-01-24 20:54:07
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jasco

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by thinka at 2009-12-26 01:24:13:
pull-down:就是两个人放到一个孤岛上,不管是什么性别,该发生的都会发生的
Co-IP:把一群人放到一个荒岛上,能不能发生故事就看你了

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8楼2010-01-25 15:58:47
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