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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 求助各位大佬，关于粗抗菌肽透析后抑菌性消失的问题急求解决
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丿涛涛不倔

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助各位大佬，关于粗抗菌肽透析后抑菌性消失的问题急求解决 已有1人参与

我现在通过酶解得到一种抗菌肽粗酶解液，抑菌试验显示有很好的抑菌性，想通过透析除盐后过柱子进一步分离纯化，问题就出在这，我用截留分子量7000D，甚至3000D的透析袋透析过后冻干，然后重新溶解后测试抑菌性能，就没！抑！菌！性！了！试了两次都这样，急求怎么解决啊，难道是我的目的抗菌肽分子量很小吗？但是看了别的文献一般抗菌肽小于3000D的很少啊，类似的都应该不至于那么小，操作有问题吗？还是我需要买截留分子量更小的透析袋试啊？急求各位大佬帮忙解决啊！
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1楼 2018-07-03 10:28:04
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丿涛涛不倔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 大星星呀哈 at 2018-08-01 09:53:46
对，跟pH是有关系的，酶用的是哪种
...

用的胃蛋白酶，pH怎么影响的呢？
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10楼2018-08-03 14:46:54
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
既然大分子没活性，只能去尝试小分子了，
另外，十几个氨基酸的抗菌肽也有啊，分子量具体是多少，还是要看你自己的样品，
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丿涛涛不倔
2楼2018-07-05 16:04:17
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丿涛涛不倔

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by zinfly at 2018-07-05 16:04:17
既然大分子没活性，只能去尝试小分子了，
另外，十几个氨基酸的抗菌肽也有啊，分子量具体是多少，还是要看你自己的样品，

你好，谢谢您的解答。这个透析后蛋白样品的抑菌性跟透析液和ph有没有关系啊，我用的ph7.0的PBS缓冲液透析的，透析后就没有抑菌性了，但是好像之前试过只用蒸馏水透析后还是存在抑菌性的。
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3楼2018-07-09 11:05:26
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A8610587

新虫 (小有名气)
跑了sds-page胶吗？粗产品的纯度怎么样？

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4楼2018-07-24 20:27:41
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丿涛涛不倔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by A8610587 at 2018-07-24 20:27:41
跑了sds-page胶吗？粗产品的纯度怎么样？

粗产品跑出来是很长一团，无法分辨分子量，所以要纯化
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5楼2018-07-27 21:14:17
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A8610587

新虫 (小有名气)
好像透析袋能透过标注的三倍分子量的（这个我不确定），你可以把没活性的样品跑下胶看看条带，如果条带损失严重，就要重新研究纯化的方法，如果条带不怎么变，有可能是粗酶液里面其他东西有抑菌效果。虽然胶图弥散，还是能大概看出分子量的吧。

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6楼2018-07-29 00:32:26
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A8610587

新虫 (小有名气)
抗菌肽分子量太小，最好跑tricine胶

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7楼2018-07-29 00:33:41
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大星星呀哈

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
8楼2018-08-01 09:53:46
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丿涛涛不倔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by A8610587 at 2018-07-29 00:32:26
好像透析袋能透过标注的三倍分子量的（这个我不确定），你可以把没活性的样品跑下胶看看条带，如果条带损失严重，就要重新研究纯化的方法，如果条带不怎么变，有可能是粗酶液里面其他东西有抑菌效果。虽然胶图弥散， ...

嗯嗯，我现在用的过葡聚糖凝胶G15柱来脱的盐，过完柱后做了抑菌性测试，还是有很好的抑菌性的，说明起抑菌作用的应该还是粗酶液中的蛋白质吧
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9楼2018-08-03 14:46:01
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