24小时热门版块排行榜    

查看: 1682  |  回复: 7

rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] 稳转丢失

lipo转入EGFP质粒后,加药G418筛选10天了。细胞开始死了很多很多,后来慢慢涨起来了。之前看绿色荧光很亮,后来越来越暗。今天把6孔板的转到瓶里养,已经完全看不见绿色荧光了,但是细胞却长得很欢脱。请问是什么原因呢?是neo没丢失而EGFP丢失了???我应该要怎么做呢?谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

应该说是丢失质粒的耐药细胞疯长起来了吧。只能重头再来了!

发自小木虫Android客户端
2楼2018-06-29 11:17:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-06-29 11:17:37
应该说是丢失质粒的耐药细胞疯长起来了吧。只能重头再来了!

请问重来的话可以怎么改进呢?是多做几批提高概率吗?谢谢!
3楼2018-06-29 12:03:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

可以这么做,筛选可以多做几个孔,否则一个周期时间哗啦啦的过去了。

发自小木虫Android客户端
4楼2018-06-29 12:03:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-06-29 12:03:59
可以这么做,筛选可以多做几个孔,否则一个周期时间哗啦啦的过去了。

谢谢!请问还有别的需要注意和改进的地方吗?
5楼2018-06-29 12:12:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

我们有人做过尝试,就是对转染细胞筛选一段时间后进行二次转染以提高筛选效率。作稳转首先要确保转染率。在条件允许情况下尝试慢病毒感染,可能会效率高一些。

发自小木虫Android客户端
6楼2018-06-29 18:05:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainontime

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-06-29 18:05:16
我们有人做过尝试,就是对转染细胞筛选一段时间后进行二次转染以提高筛选效率。作稳转首先要确保转染率。在条件允许情况下尝试慢病毒感染,可能会效率高一些。

太感谢了!我想给您评分送金币,但是显示“当前回帖不是应助回帖,您不能对此进行金币奖励哦”。您回个应助帖,我好给您金币。
7楼2018-07-02 09:11:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

举手之劳,个人意见,你要是觉得受用就行了。

发自小木虫Android客户端
8楼2018-07-02 09:20:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rainontime 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 11/550 2026-03-25 16:17 by 87639
[考研] 材料学硕333求调剂 +4 北道巷 2026-03-24 4/200 2026-03-25 14:16 by mapenggao
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 295材料求调剂,一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见