24小时热门版块排行榜    

查看: 3131  |  回复: 10

星星,你

新虫 (初入文坛)

[求助] 80bp的DNA怎么回收? 已有2人参与

我是做核酸适配体的,筛选后需要回收,DNA长度是80bp,用乙醇沉淀,回收率不到10%,,有哪位大神帮我解决一下,谢谢啦。

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
6楼2018-06-29 12:58:19
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
普通回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
2楼2018-06-28 17:19:26
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

星星,你

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2018-06-28 17:19:26
正常的胶回收试剂盒就行啊

你用的是什么试剂盒,我用试剂盒回收后浓度太低,不能进行pcr扩增,为下一轮筛选做准备

发自小木虫Android客户端
3楼2018-06-29 10:02:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

petty04

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-06-30 08:42:10
乙醇沉降过程中加入一点糖原glycerol,0.5-1 uL纯糖原溶液即可,可以有效地增加沉降的效率,尤其在DNA/RNA的量本身偏低时对增加回收率效果很显著。另外,糖原的存在不会影响适配体筛选。
4楼2018-06-29 10:55:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

petty04

新虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by petty04 at 2018-06-29 10:55:22
乙醇沉降过程中加入一点糖原glycerol,0.5-1 uL纯糖原溶液即可,可以有效地增加沉降的效率,尤其在DNA/RNA的量本身偏低时对增加回收率效果很显著。另外,糖原的存在不会影响适配体筛选。

不好意思,英文写错了,糖元-glycogen
5楼2018-06-29 10:57:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星星,你

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by petty04 at 2018-06-29 10:57:02
不好意思,英文写错了,糖元-glycogen...

我加了线性聚丙烯酰胺,和糖原的作用差不多回收率还是低,

发自小木虫Android客户端
7楼2018-06-29 13:03:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星星,你

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2018-06-29 12:58:19
就是普通的试剂盒,我做载体都没问题  做PCR更没问题了,回收的时候加点异丙醇...

我的片段比较小,才80bp,用普通的试剂盒试了不行

发自小木虫Android客户端
8楼2018-06-29 13:04:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
9楼2018-06-29 13:20:44
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)



drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-07-04 10:29:07
用purimag的磁珠法回收,可以到50bp

发自小木虫IOS客户端
10楼2018-07-03 21:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 星星,你 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-31 02:56 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-31 02:54 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-31 02:34 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 3/150 2026-08-31 01:59 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-31 00:45 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 15/750 2026-08-31 00:10 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-30 22:24 by xiangy672
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:51 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:50 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 17:47 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见