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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 80bp的DNA怎么回收？
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星星，你

新虫 (初入文坛)

[求助] 80bp的DNA怎么回收？ 已有2人参与

我是做核酸适配体的，筛选后需要回收，DNA长度是80bp,用乙醇沉淀，回收率不到10%，,有哪位大神帮我解决一下，谢谢啦。

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1楼 2018-06-28 16:29:14
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匿名

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6楼2018-06-29 12:58:19
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匿名

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2楼2018-06-28 17:19:26
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星星，你

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2018-06-28 17:19:26
正常的胶回收试剂盒就行啊

你用的是什么试剂盒，我用试剂盒回收后浓度太低，不能进行pcr扩增，为下一轮筛选做准备

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3楼2018-06-29 10:02:59
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petty04

新虫 (职业作家)

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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-06-30 08:42:10
乙醇沉降过程中加入一点糖原glycerol，0.5-1 uL纯糖原溶液即可，可以有效地增加沉降的效率，尤其在DNA/RNA的量本身偏低时对增加回收率效果很显著。另外，糖原的存在不会影响适配体筛选。
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4楼2018-06-29 10:55:22
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petty04

新虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by petty04 at 2018-06-29 10:55:22
乙醇沉降过程中加入一点糖原glycerol，0.5-1 uL纯糖原溶液即可，可以有效地增加沉降的效率，尤其在DNA/RNA的量本身偏低时对增加回收率效果很显著。另外，糖原的存在不会影响适配体筛选。

不好意思，英文写错了，糖元-glycogen
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5楼2018-06-29 10:57:02
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星星，你

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by petty04 at 2018-06-29 10:57:02
不好意思，英文写错了，糖元-glycogen...

我加了线性聚丙烯酰胺，和糖原的作用差不多回收率还是低，

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7楼2018-06-29 13:03:32
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星星，你

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2018-06-29 12:58:19
就是普通的试剂盒，我做载体都没问题  做PCR更没问题了，回收的时候加点异丙醇...

我的片段比较小，才80bp，用普通的试剂盒试了不行

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8楼2018-06-29 13:04:21
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匿名

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9楼2018-06-29 13:20:44
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
★
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-07-04 10:29:07
用purimag的磁珠法回收，可以到50bp

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10楼2018-07-03 21:20:59
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